پروفایل استاد - دانشگاه بوعلی سینا همدان
دانشیار
تاریخ بهروزرسانی: 1403/10/01
عبدالمجید محمدزاده
دامپزشکی / پاتوبیولوژی
رساله های دکتری
-
جداسازی، تعیین الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی و بررسی مولکولی عوامل حدت سویه هایتروپرلا پیوژنزجداشده از نمونه های بالینی گاو
1397تروپرلاپیوژنز یکی از عوامل مهم ایجادکننده بیماری های چرکی در گاو است که خسارات فراوانی را به صنعت دامداری وارد می نماید. این باکتری باعث ایجاد پنومونی، ورم پستان، متریت، آبسه های کبدی، اوتیت، پریتونیت، اندوکاردیت، استئومیلیت، لنفادنیت و عفونت های رحمی در گاو و گوسفند و همچنین عفونت های چرکی در گونه-هایحیات وحشمی شود. از اهداف مهم مطالعه حاضر، تعیین نقش تروپرلا پیوژنز در عفونت های رحمی، آبسه های جلدی و التهاب پستان در گاوداری های اطراف تهران و همچنین بررسی فراوانی ژن های حدت و برخی از ژن های مرتبط با مقاومت آنتی بیوتیکی در جدایه هایتروپرلا پیوژنزبود. تعیین ژنوتیپ و بررسی بیان برخی از ژن های مرتبط با بیماری زایی در شرایط برون تنی و درون تنی از دیگر اهداف تحقیق بود. مواد و روش کار: در مطالعه حاضر 750 نمونه (200 نمونه از ترشحات متریت، 150 نمونه از آبسه های جلدی، 400 نمونه از شیر ورم پستان) از 22 گاوداری در اطراف تهران اخذ گردید و پس از کشت، با روش های بیوشیمیایی و مولکولی مورد شناسایی قرار گرفتند. حساسیت آنتی بیوتیکیبا روش کرپی بایر برای تمامی جدایه ها مشخص گردید. همچنین با روش مولکولی هشت ژن حدت (plo, nanH, nanP, fimA, fimG, fimE, fimC, cbpA) و سه ژن مقاومت آنتی بیوتیکی (ermX, ermB, tetW)بررسی شده و با روش BOXPCR همه جدایه ها ژنوتایپینگ شده و درخت فیلوژنتیکی آن ها ترسیم گردید. سپس تغییرات بیان چهار ژن مهم در بیماری زایی، در محیط آزمایشگاهی و مدل موشی به روشRealtime PCRموردمطالعه قرار گرفت.نتایج: با استفاده از روش های بیوشیمیایی و مولکولی،65 جدایه ازنمونه های متریت، 55 جدایه ازنمونه های ورم پستان و 68 جدایه ازنمونه های آبسه های جلدیبه عنوان باکتری تروپرلا پیوژنزشناسایی گردید. بر اساس تغییرات آزمون های بیوشیمیایی در بین جدایه ها، هشت بیوتیپ در جدایه های متریت، پنج بیوتیپ درجدایه هایورم پستان و هفت بیوتیپ هم درجدایه هایآبسه های جلدی مشاهده شد که بیوتیپ های یک و سه ارتباط معنی داری با شدت بیماری، فراوانی ژن های حدت و برخی خصوصیات فنوتیپی داشتند. در آزمون آنتی بیوگرام بالاترین حساسیت به آنتی بیوتیک هایآمپی سیلین، آموکسی سیلین، پنی سیلین، جنتامایسین، سفتریاکسون و بیشترین مقاومت آنتی بیوتیکی هم به آنتی بیوتیک های تریمتوپریم سولفومتوکسازول، تتراسیکلین، اریترومایسین و تایلوزین
-
بررسی فنوتیپی و ژنوتیپی توانایی تشکیل بیوفیلم استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده از منابع مختلف و تعیین خواص ضدبیوفیلمی تعدادی اسانس گیاهی بر این جدایه ها
1396چکیده: باکتری استافیلوکوکوس اورئوس یک باکتری فرصت طلب است که عامل طیف وسیعی از بیماری های عفونی در انسان و دام می باشد. توانایی تشکیل بیوفیلم به عنوان یک فاکتور حدت، نقش مهمی در بیماریزایی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس دارد. در حالت بیوفیلم، مقاومت باکتری نسبت به مواد ضدباکتریایی شیمیایی و فیزیکی و همچنین سیستم ایمنی بدن افزایش می یابد. هدف از انجام مطالعه حاضر بررسی جنبه های مختلف بیوفیلم برخی از جدایه های باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بود. به این صورت که در ابتدا توانایی تشکیل بیوفیلم جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس اخذ شده از منابع انسانی، دامی و غذایی با تکنیک های فنوتیپی مانند آزمون های میکروتیتر پلیت و کنگو رد آگار و روش های ژنوتیپی از جمله (Real time PCR) بررسی و مقایسه شد. سپس اثر اسانس گیاهان آویشن دنایی، مرزه تابستانه، زیره سبز، پونه کوهی، زنیان و گلپر روی ویژگی های مختلف بیوفیلم باکتری استافیلوکوکوس اورئوس بررسی گردید. از جمله مهمترین این جنبه ها، بررسی خاصیت مهارکنندگی رشد و کشندگی، مهارکنندگی تشکیل بیوفیلم، مهارکنندگی تولید پلی ساکارید خارج سلولی، مهارکنندگی افلوکس پمپ NorA و مهارکنندگی سیستم حد نصاب بود. در نهایت، ترکیبات تشکیل دهنده اسانس ها با استفاده از کروماتوگرافی گازی مشخص شدند و همچنین با استفاده از روش کشت سلولی، میزان سمیت اسانس های مورد مطالعه روی محیط کشت Vero بررسی شد. در مطالعه حاضر یک واکنش Multiplex PCR جهت بررسی فراوانی ژن های, fnbA ,clfB atlA ,icaAD و sasG طراحی گردید. نتایج آزمون فنوتیپی نشان داد که با تست های فنوتیپی، تفاوت معنی داری میان جدایه های اخذ شده از منابع مختلف از لحاظ توانایی تشکیل بیوفیلم وجود ندارد (P>0.05). ژن های وابسته به تشکیل بیوفیلم icaAD)، bap، fnbA، clfB، sasG و (atl بجز bapدر بین همه جدایه ها فراوانی بالایی داشتند. ژن bap تنها در دو جدایه دامی یافت شد. نتایج قسمت دوم کار نشان داد که همه اسانس های گیاهی به استئنای اسانس گیاه گلپر دارای خواص ضدباکتریایی و ضدبیوفیلمی قابل قبولی علیه جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس و سویه استاندارد هستند. نتایج Real time PCR مربوط به افلوکس پمپ NorA، کاهش معنی دار بیان این پمپ را تحت تاثیر غلظت MIC/2 اسانس های گیاهی آویشن، مرزه، زیره، پونه و زنیان نشان داد؛ این قضیه با استفاده از روش Chec
-
تعیین تیپ ژنتیکی استافیلوکوکوس اورئوسهای جدا شده از منابع مختلف بر اساس کاست کروموزومی SCCmec) mec) و پلی مورفیسم ژن های coa و spa
1396تعیین تیپ استافیلوکوکوس اورئوس جهت تعیین چگونگی توزیع و اپیدمیولوژی آن، ارتباط بین پاتوژن ها و طراحی روش هایی جهت کنترل بیماری های ناشی از آن ها امری لازم و ضروری می باشد. هدف از مطالعه اخیر، تعیین ارتباط ژنتیکی احتمالی بین جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس با منابع مختلف و شناسایی مسیرهای احتمالی انتشار عفونت با استفاده از روش های مولکولی و فنوتیپی بود. این تحقیق یک مطالعه توصیفی- تحلیلی بود که در سال های 1393 تا 1395 انجام گردید. جامعه هدف در این مطالعه، 208 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس (83 جدایه دامی، 60 جدایه انسانی و 65 جدایه غذایی) بود که همه آنها با استفاده از روش های فنوتیپی (بیوتایپینگ) و مولکولی شامل: (Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD و Restriction Fragment Length Polymorphism(RFLP) بر اساس ژن های spa (ژن کدکننده پروتئین A) و coa (ژن کد کننده کوآگولاز) مورد تایپینگ قرار گرفتند. در ادامه، تعدادی از جدایه ها با روش های (Staphylococcal Cassette Chromosome mec) SCCmec، ترادف یابی یک جایگاهی ((Single-locus Sequence Typing (SLST) ژن spa و الکتروفورز در میدان الکتریکی ضربان دار (Pulsed-field gel Electrophoresis (PFGE)) تیپ بندی شدند.آنالیز پروفایل ها و رسم دندروگرام برای روش های RAPD-PCR و PFGE به ترتیب با استفاده از نرم افزارهای NTSYS-PC و Gel Compar II انجام گرفت و تیپ های spa با نرم افزار (Applied Maths) BioNumerics 7.6 تعیین شد. از 208 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس که با روش بیوتایپینگ دسته بندی شدند، 96 جدایه (2/46 درصد) متعلق به بیوتیپ های با میزبان خاص (Host Specific: HS) گزارش شد که شامل 30 اکوار انسانی، 23 اکوار گاوی، 30 اکوار گوسفندی و 13 اکوار مرغی بود و 90 جدایه (2/43 درصد) در گروه بیوتیپ های بدون میزبان خاص (Non-host Specific: NHS) جای گرفت و بقیه جدایه ها (6/10 درصد) در هیچ تیپی قرار نگرفتند. در روش RAPD-PCR، در مجموع 47 پروفایل مختلف مشاهده شد و در تشابه 80 درصد، 9 خوشه ایجاد شد که بیشتر سویه های جدا شده از منابع مختلف در خوشه های مشخص قرار گرفتند. درمجموع نتایج RFLP-spa در بین 208 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس، با استفاده از دو آنزیم HindIII و HinfI، 15 الگو و در RFLP-coa با استفاده از آنزیم AluI، 12 الگوی مختلف ایجاد شد. در روش SCCmec تایپینگ هم، بیشت
پایاننامههای کارشناسیارشد
-
تعیین گروههای سرمی اشریشیا کلیهای جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداریهای شهرستان همدان به روش مولکولی
1402بیماری ورم پستان، التهاب بافت پستان است که بوسیله عوامل مختلفی ایجاد شده و بر کیفیت و کمیت شیر تاثیر میگذارد و عامل بیشترین خسارتهای اقتصادی در صنعت گاو شیری در بسیاری از کشورها است. از مهمترین علل ایجادکننده این بیماری، ورود میکروارگانیسمهای بیماریزا به خصوص باکتریها به داخل بافت پستان میباشد. باکتری اشریشیا کلی، یک پاتوژن متعلق به خانواده انتروباکتریاسه است و از عوامل اصلی ایجادکننده عفونتهای دامی، به ویژه در عفونت پستان گاو محسوب میشود. بیماریزایی این باکتری با توجه به عوامل بیماریزا و گروههای سرمی متفاوت است. از آنجایی که گروهبندی بر اساس آنتیژن O اشریشیا کلی بیماریزا یک روش استاندارد برایگروهبندی سویهها در مطالعات اپیدمیولوژیک میباشد، بنابراین در مطالعه حاضر سروگروپهایO157 ، O26 ، O111 و O121 در اشریشیا کلیهای جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداریهای صنعتی شهرستان همدان، به روش مولکولی PCR بررسی شد و با توجه به نتایج حاصل از بررسی حضور ژنهای مرتبط با گروههای سرمی O در تعداد 62 ایزوله اشریشیا کلی جداشده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداریهای شهرستان همدان، مشخص شد که 1 جدایه در گروه سرمی O121 قرار گرفت که این گروه هم از نظر بیماریزایی در گاو و هم در انسان حائز اهمیت است.
-
بررسی آزمایشگاهی اثر ضد باکتریایی فاژ Escherichia phage VaT-2019a بر اشریشیا کلی های بیماری زای پرندگان جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز در مرغداری های استان همدان
1402باکتری اشریشیا کلی یک پاتوژن بسیار مهم و سومین عامل اسهال در کشورهای درحال توسعه است. طبق تخمین سازمان بهداشت جهانی سالانه پنج میلیون کودک در سراسر جهان در اثر اسهال حاد جان خود را از دست می دهند. با بهره گیری از روش-هایی که موجب مهار رشد این باکتری می شود می توان با گسترش روزافزون آن مقابله کرد. با توجه به افزایش بی رویه ی مقاومت آنتی بیوتیکی، روش های نوینی همانند فاژدرمانی را می توان بکار برد که علاوه بر خاصیت ضدباکتریایی هیچ ضرری برای محیط زیست و سلول های یوکاریوتی ندارند. هدف اصلی از انجام این مطالعه بررسی آزمایشگاهی اثر ضد باکتریایی فاژ Escherichia phage VaT-2019a بر اشریشیا کلی های بیماری زای پرندگان ( Avian Pathogenic Escherichia coli: APEC) جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز در مرغداری های استان همدان بود. برای این منظور تعداد 100 نمونه از جدایه های APEC جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز در مرغداری های استان همدان که در مطالعات قبلی جداسازی، شناسایی، تایید هویت و نگهداری شده بود مورد بررسی قرار گرفت. در این مطالعه از فاژ اشریشیای کلی Escherichia phage VaT-2019a که توسط بریزی و همکاران از فاضلاب کشتارگاه ها جداسازی و تعین هویت گردیده بود استفاده شد. همچنین با مراجعه به کشتارگاه طیور شهرستان همدان و جمع آوری نمونه فاضلاب، یک فاژ جدید بنام Escherichia phage AG-MK-Basu.2022 جداسازی و خالص سازی گردید که ابتدا، به تعیین ساختار مورفولوژیک و بعضی از ویژگی های مهم آن اعم از گستره ی میزبانی، پایداری فاژ در شرایط متفاوت pH، دما و درصدهای مختلف نمک پرداخته شد و در نهایت بررسی آزمایشگاهی اثر ضد باکتریایی این فاژ بر جدایه های APEC انجام گرفت. نتایج بدست آمده در این مطالعه حاکی از آن بود که 95% جدایه های APEC در روش اسپات نسبت به هردو فاژ نقاط لایزشده تشکیل داده بودند و نشان دهنده آن است که استفاده از این دو فاژ می تواند به عنوان کاندیدا های مهم جهت کنترل و درمان موثر کلی باسیلوز طیور مطرح باشد.
-
عیین گروههای فیلوژنیک اشریشیا کلی جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداریهای شهرستان همدان بر اساس روش کلرمونت
1402ورم پستان، واکنش التهابی بافت غده پستانی به دلایل مختلف است که مهم ترین علت آن، ورود میکروارگانیسم های بیماری زا به خصوص باکتری ها، به داخل بافت پستان می باشد. این بیماری در سراسر جهان به صنعت دامپروری و به تولیدکنندگان لبنی خسارات فراوانی وارد می کند و به همین دلیل یکی از بیماری های مهم در گاوهای شیری به شمار می رود. بر اساس وجود یا عدم وجود علائم بالینی، این بیماری به دو فرم بالینی و تحت بالینی بروز پیدا می کند. علاوه بر این، ورم پستان را می توان بر اساس عامل ایجاد کننده آن، تحت عناوین محیطی و مسری (واگیردار) طبقه بندی کرد. اشریشیا کلی، یک باکتری میلهای گرم منفی رودهای است که به خانواده انتروباکتریاسه تعلق دارد و به عنوان یکی از مهمترین عوامل بیماری ورم پستان محیطی شناخته میشود. باکتری اشریشیا کلی دارای 8 گروه فیلوژنیک شامل گروه های A ، B1 ، B2، C ، D، E، F و Clade I میباشد. مطالعه حاضر به منظور تعیین گروههای فیلوژنیک باکتری اشریشیا کلی جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در گاوداریهای صنعتی شهرستان همدان انجام شده است. در این مطالعه، گروههای فیلوژنیک 65 جدایه اشریشیا کلی جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی که در مطالعات قبلی جداسازی، شناسایی و تایید هویت شده بودند، با استفاده از روش واکنش زنجیرهای پلی مراز چهارگانه (Quadruplex PCR) تعیین گردید. در پایان 48% ، 11% ، 3% ، 5/1% و 5/1% از جدایه ها به ترتیب در گروههای فیلوژنیک B1 ، E، A ، B2 و C قرار گرفتند و 35% از جدایه ها نیز در هیچکدام از این گروه های فیلوژنیک قرار نگرفتند (Unknown). نتایج این مطالعه نشان میدهد که اکثر جدایههای اشریشیا کلی جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در گاوداریهای صنعتی شهرستان همدان، به گروه فیلوژنی B1 تعلق دارند.
-
مطالعه احتمال باکتریمی بروسلا آبورتوس متعاقب واکسیناسیون گاوهای سیمنتال فلکویه بدون سابقه، با واکسن RB51
1401بروسلا آبورتوس یک باکتری گرم منفی و کوکوباسیل داخل سلولی اختیاری از خانواده بروسلاسه است که عامل بروسلوز گاوی، به عنوان یکی از مهمترین بیماری های دامی می باشد. یکی از راه های اصلی کنترل و پیشگیری از این بیماری، واکسیناسیون است. واکسن RB51 یا IRIBAواکسن اصلی مورد مصرف بر علیه بروسلوز گاوی است. امروزه در ایران واکسیناسیون گوساله های 4 تا 12 ماهه با دُز کامل واکسن (Full Dose IRIBA) RB51 ساخت ایران، حاوی CFU/dose109×34-10 و گوساله های بالای12 ماه و گاوهای بالغ با دُز کاهیده (Reduced Dose IRIBA) حاوی CFU/dose109× 4/3-1 صورت می گیرد. تزریق این واکسن ممکن است با حضور باکتری واکسن در خون (باکتریمی) همراه باشد. هدف از این مطالعه بررسی احتمال و مدت زمان حضور باکتری بروسلا پس از واکسیناسیون با دُزهای کامل و کاهیده در خون گاوهای بالغی است که سابقه واکسیناسیون علیه بروسلوز را نداشتند. در این مطالعه از بین 500 راس گاو ماده بالغ نژاد سیمنتال- فلکویه وارداتی یک شکم زایش و با سن 15/2±2/27 ماه که در طول عمر خود سابقه هیچ واکسیناسیون بروسلوزی را نداشتند، 50 راس به صورت تصادفی، انتخاب و سپس به دو گروه مساوی تقسیم شدند. از روز شروع مطالعه (روز صفر)، دو گروه از گاوهای مذکور تحت تزریق واکسن IRIBA به صورت زیرجلدی قرار گرفتند. به گروه اول واکسن دُز کامل، حاوی CFU/dose109×34-10 و به گروه دوم، واکسن از نوع کاهیده، حاوی CFU/dose109× 4/3-1 تزریق شد و 32 روز بعد به هر دو گروه، واکسن دُز کامل تزریق گردید. پس از شروع مطالعه، خون گاوها در روزهای 3، 7، 14، 21، 28، 35، 42،49، 56 و 64 پس از واکسیناسیون اخذ شد و تمام نمونه ها با آزمون PCR جهت ردیابی ژنوم باکتری بروسلا مورد ارزیابی قرار گرفتند. سپس نمونه هایی که از نظر جنس بروسلا مثبت شدند، با استفاده از پرایمر واکسن RB51 با روش PCR آزمایش شدند. نتایج نشان داد که ژنوم باکتری در خون، پس از واکسیناسیون قابل ردیابی بود. بیشترین فراوانی آن در روز 14 (گروه دُز کامل، 19 راس از 25 راس، برابر 76 درصد و گروه دُز کاهیده، 16 راس از 25 راس، برابر 7/66 درصد) و کمترین فراوانی در روز 7 (گروه دُز کامل2 راس از 25 راس، برابر 8 درصد و گروه دُز کاهیده صفر راس از 25 راس، برابر صفر درصد) و روز 21 (گروه دُز کامل، 1 راس از 24 راس، برابر 2/4 درصد و گروه دُز کاهیده، 2 راس از 23
-
جستجوی مولکولی حضور بروسلا در نمونه های شیر گوسفندان شهرستان دورود استان لرستان 1397
1401چکیده: یکی از بیماری های مهم مشترک و خطرناک بین انسان و دام بروسلوز است. شیوع این بیماری مشترک در دنیا بالا بوده است و در تعداد زیادی از کشورها و از جمله ایران، این بیماری به صورت بومی دیده می شود. هدف از این مطالعه، بررسی آلودگی نمونه های شیر شهرستان دورود به بروسلا و وضعیت میزبان های غیر اختصاصی بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی-تنسیس با استفاده از آزمایش PCR است. 96 نمونه از شیر گوسفندان شهرستان دورود استان لرستان اخذ گردید. DNA به طور مستقیم از شیر ها استخراج شد و بعد تست PCR برای همه ی نمونه ها گذاشته شد. نتایج نشان داد که از کل 96 نمونه، 16 نمونه (66/16%) برای جنس بروسلا مثبت بودند و بعد از انجام تست PCR برای تشخیص جنس، 6 نمونه (25/6%) فقط بروسلا آبورتوس مثبت بودند، 1 نمونه (04/1 %) فقط بروسلا ملی تنسیس مثبت بود، 5 نمونه (20/5%) برای هر دو گونه بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس مثبت بود و 4 نمونه (16/4 %) برای دیگر گونه های دیگر بروسلا مثبت بودند. با توجه به نتایج مطالعه حاضر، نمونه های مثبت گونه ی بروسلا آبورتوس از بروسلا ملی تنسیس بیشتر بود و همچنین بعضی ازنمونه ها هم زمان به هر دو گونه بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس آلوده بودند. در ادامه پیشنهاد می شود برای تشخیص باکتری بروسلا و تعیین گونه های بروسلا در نمونه های شیر گله های گوسفند از آزمون PCR استفاده شود.
-
جستجوی مولکولی بروسلا در نمونه های شیر بزهای شهرستان بروجرد استان لرستان
1401چکیده: بروسلوز نام عمومی است که برای عفونت های حیوانی و انسانی ناشی از چندین گونه از جنس بروسلا استفاده می شود. بروسلوز یکی از مهم ترین و گسترده ترین بیماری های مشترک بین انسان و دام در جهان است. از شش گونه ی بروسلا که به عنوان عامل بیماری انسان شناخته شده است، بروسلا ملی تنسیس بیشترین تاثیر را بر سلامت عمومی دارد زیرا این گونه بدخیم ترین گونه است و بیشترین شیوع را در جمعیت نشخوارکنندگان کوچک در بسیاری از مناطق جهان دارد. گونه های بروسلا باکتری های میله ای، کوچک و گرم منفی (5/0-7/0×6/0-5/1 میکرومتر) هستند که اغلب کوکوباسیل به نظر می رسند. رایج ترین راه ابتلای انسان به این بیماری خوردن یا نوشیدن لبنیات غیرپاستوریزه است. به دلیل اقبال اخیر مردم از شیرهای با منشا نشخوارکنندگان کوچک، برآن شدیم که وضعیت دفع ژنوم باکتری بروسلا در بزها به عنوان یک منبع جدید تولید شیر را بررسی کنیم. در این مطالعه، 96 نمونه شیر بز از گله های بز 7 منطقه (اسدخانی، دره گرگ، جهان آباد، کاروانه، کناروند، شاهویران و شیشه) واقع در شهرستان بروجرد جمع آوری و برای انجام تست های آزمایشگاهی به دانشکده پیرادامپزشکی دانشگاه بوعلی سینا همدان انتقال یافت. بعد از استخراج DNA از نمونه های شیر، شناسایی جنس بروسلا و گونه های بروسلا ملی تنسیس و بروسلا آبورتوس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی با آزمون PCR انجام شد و در نهایت نتایج مورد بررسی قرار گرفت. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که 4/34% (33 نمونه شیر) به باکتری بروسلا آلوده بودند که بیشترین درصد آلودگی متعلق به مناطق شیشه و اسدخانی با 7/91% و 3/58% و کمترین درصد آلودگی متعلق به مناطق جهان آباد و کاروانه با مقدار فراوانی 3/8% بود. شیوع حضور ژنوم گونه بروسلا ملی تنسیس در منطقه ی جهان آباد، کاروانه و شیشه 33/8% و همینطور شیوع حضور ژنوم گونه بروسلا آبورتورس در منطقه ی شیشه 67/66% برآورد شد. حضور بروسلا در بز می تواند نه تنها به دلیل بروسلا ملی تنسیس، بلکه به دلیل بروسلا آبورتوس نیز ایجاد شود. نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که متاسفانه بیماری در شهرستان بروجرد و به خصوص دو منطقه تابعه شامل شیشه و اسدخانی از شیوع بالایی برخوردار است و بنابراین مراجع ذیربط باید هرچه سریع تر در جهت کاهش شیوع این بیماری در این مناطق ذکر شده، اقدامات لازمه را انجام دهند.
-
جستجوی مولکولی حضور ژن های pgaC، csgD و airR دخیل در تشکیل بیوفیلم در اشریشیا کلیهای جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در شهرستان همدان
1400اشریشیا کلی یک باکتری است که بیماری ورم پستان را در گاوهای شیری ایجاد نموده و باعث کاهش تولید شیر، تغییر در ترکیب و کیفیت شیر و حتی مرگ گاوهای شیری را سبب میشود. عوامل متعددی از جمله اشریشیا کلی در ایجاد بیماری ورم پستان نقش داشته، و در 80 درصد موارد ورم پستان کلیفرمی یافت میشود. اعتقاد بر این است که تشکیل بیوفیلم در بسیاری از بیماریها از جمله در ورم پستان نقش داشته و تشکیل بیوفیلم می تواند شرایط مناسبی را برای ماندگاری باکتری در این محل فراهم نماید. بیوفیلم اجتماع باکتریایی است که در آن باکتریها به یک سطح زنده یا غیر زنده اتصال داشته و در یک ماتریکس خارج سلولی محصور شده اند. بیوفیلم یک خاصیت مهم برای حدت و بیماریزایی اشریشیا کلی است که در پاسخ به سیگنال های مختلف محیطی تشکیل شده و ژنهای زیادی از جمله ژن csgD، pgaC و ariR در تشکیل آن نقش دارد. به همین دلیل مطالعه حاضر با هدف بررسی فنوتیپی توانایی تشکیل بیوفیلم در جدایههای بدست آمده از نمونههای شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی و همچنین جستجوی مولکولی ژنهای مذکور در آنها انجام شد. نتایج بررسی فنوتیپی توانایی تشکیل بیوفیلم با روش میکروتیتر پلیت در این تحقیق نشان داد که از 62 جدایه مورد مطالعه، 27 جدایه (54/43%) توانایی تشکیل بیوفیلم را داشت و 35 جدایه (45/56%) توانایی تشکیل بیوفیلم را نداشت، از 27 جدایه تشکیل دهنده بیوفیلم، 4 جدایه (45/6%) تشکیل دهنده بیوفیلم قوی، 19 جدایه (65/30%) تشکیل دهنده بیوفیلم متوسط، 4 جدایه (45/6%) تشکیل دهنده بیوفیلم ضعیف بودند، و رابطه آماری معنیدار بین جدایههای تشکیل دهنده و عدم تشکیل بیوفیلم مشاهده نشد (374/0=P). همچنین نتایج آزمون Multiplex PCR نشان داد که ژن ariR در 61 جدایه (38/98%)، ژن csgD در 62 جدایه (100%)، ژن pgaC در 58 جدایه (54/93%) حضور داشته، و در 57 جدایه (94/91%)، حضور همزمان هرسه ژن مشاهده شد، و رابطه آماری معنیدار بین نتایج فنوتیپی تشکیل بیوفیلم با نتایج ژنوتیپی وجود نداشت (123/0=P). بنابراین به نظر میرسد اگرچه حضور این ژنها در تشکیل بیوفیلم نقش موثری دارد، ولی احتمالا حضور سایر ژنها نیز جهت کسب توانایی تشکیل بیوفیلم در جدایهها نقش بسزایی دارد.
-
جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های شیر جمع آوری شده از گاوداری های سنتی شهرستان بهار در سال 1400
1400چکیده: ورم پستان یکی از شایع ترین بیماریها و از نظر اقتصادی، مهمترین بیماری در صنعت پرورش گاو شیری به شمار می آید که میتواند باعث تحمیل خسارت های اقتصادی فراوان به صنعت دامپروی شود. در میان عوامل مسبب ورم پستان در گاو، استافیلوکوکوس اورئوس به عنوان یکی از اصلیترین عوامل باکتریایی مطرح می باشد که اشکال مختلف ورم پستان را ایجاد میکند و بویژه نوع تحت بالینی آن از نظر اقتصادی بسیار با اهمیت است. لذا مطالعه حاضر با هدف جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های شیر جمع آوری شده از گاوداری های سنتی شهرستان بهار در سال 1400 انجام شد. بدین منظور تعداد 127 نمونه شیر از گاو های به ظاهر سالم جمعآوری و آزمون ورم پستان کالیفرنیایی (CMT) بر روی تمامی نمونه ها انجام شد. سپس به منظور جداسازی باکتری استافیلوکوکوس اورئوس، نمونه های شیر بر روی محیط بلاد آگار کشت داده شدند. در ادامه جدایه های با استفاده از تست های بیوشیمیایی مانند رنگآمیزی گرم، تست کاتالاز و واکنش در محیط کشت مانیتول سالت آگار مورد شناسایی اولیه قرار گرفتند. سپس هویت تمام جدایه های مشکوک به استافیلوکوکوس اورئوس با استفاده از آزمون PCR و بررسی حضور ژن femA، مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که از 127 نمونه شیر اخذ شده، 91 نمونه (65/71%) در CMT دارای امتیاز بالا بودند. همچنین نتیجه کشت باکتریاییِ 89 نمونه (08/70%) در محیط بلاد آگار مثبت بود. از 91 نمونهای که در CMT امتیاز بالا داشتند، 77 (61/84%) نمونه از نظر کشت باکتریایی در محیط بلاد آگار مثبت بودند. در مجموع از 11 نمونه (66/8%) از 127 نمونه جمع آوری شده، باکتری استافیلوکوکوس اورئوس جدا شد که تمامی این نمونه ها در تست CMT نیز دارای امتیاز بالا بودند. همچنین مشخص شد که در ابتلا به ورم پستان تحت بالینی، استافیلوکوکوس اورئوس با سن، سابقه ورم پستان، شرایط بهداشتی گاوداری، سابقه سقط و فاصله از زایش کمتر از 150 روز، ارتباط دارد. نتایج این مطالعه نشان داد که ورم پستان تحت بالینی در گاوداری های سنتی شهرستان بهار شایع بوده و همچنین باکتری استافیلوکوکوس اورئوس به عنوان یکی از عوامل مسبب ورم پستان تحت بالینی گاو در شهرستان بهار مطرح میباشد. بنابراین پیشنهاد می شود اقدامات بهداشتی و مدیریتی به شکل مناسب و موثر تری صورت گیرد و شیوع ورم پستان تحت بالینی در بی
-
جستجوی مولکولی اینتگرون های کلاس I، II و III در جدایه های اشریشیا کلی بدست آمده از نمونه های شیر ورم پستان بالینی گاو در شهرستان همدان
1400چکیده امروزه بواسطه گسترش زیاد مقاومتهای آنتیبیوتیکی، بررسی حساسیت جدایههای باکتریایی نسبت به آنتیبیوتیکهای مختلف و جستجوی ژنهای دخیل در تکوین مقاومتهای آنتیبیوتیکی از اهمیت بسیار بالایی برخودار است. این مساله بویژه در مورد باکتریهای خانواده انتروباکتریاسه بارزتر میباشد. یکی از انواع ژنهای موثر در این خصوص، اینتگرونها هستند که در زمینه انتقال مقاومتهای دارویی نقش بسزایی دارند. در واقع اینتگرون ها اجزای ژنتیکی متحرکی هستند که ژن های مقاومت دارویی را که در کاست های ژنی قرار دارند، بر روی پلاسمیدها، کروموزوم ها و ترانسپوزون ها جابجا می کنند و در نتیجه سبب انتقال ژنها به صورت افقی در باکتری ها و تکوین مقاومتهای چندگانه در آن ها سبب می شوند. لذا مطالعه حاضر با هدف جستجوی مولکولی اینتگرونهای کلاس I، II و III در جدایه های اشریشیا کلی بدست آمده از نمونه های شیر ورم پستان بالینی گاو در شهرستان همدان ایران انجام شد. در این تحقیق 62 جدایه اشریشیا کلی که در مطالعات پیشین جداسازی و هویت آن ها بواسطه تست های بیوشیمیایی، کشت در محیط های اختصاصی و PCR اختصاصی اشریشیا کلی تایید شده بود، مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که از 62 جدایه، 31 جدایه (50%) واجد ژن اینتگرون کلاس I و 6 جدایه (68/9%) واجد اینتگرون کلاس II بودند اما هیچ یک از جدایه ها از نظر اینتگرون کلاس III مثبت نبود و در میان آن ها، 5 جدایه (06/8%) بطور همزمان ژنهای اینتگرون کلاس I و II را دارا بودند. بدین ترتیب نتایج مطالعه حاضر نشان داد که در مجموع حدود 52 درصد از جدایههای اشریشیا کلی مورد مطالعه، واجد حداقل یکی از ژنهای اینتگرونها بودهاند که نشان از شیوع درصد نسبتا بالایی از ژنهای مرتبط با مقاومتهای آنتیبیوتیکی در جدایههای دامی میباشد، هرچند نسبت به جدایههای اشریشیا کلی انسانی فراوانی به مراتب کمتری را نشان میدهد. لذا توصیه اکید می شود، به منظور جلوگیری از بقاء و انتشار سویههای باکتریایی مقاوم در منطقه و انتقال احتمالی مقاومت آنتیبیوتیکی به سایر باکتری ها، به بهداشت فردی، بهداشت دام و محیط و جلوگیری از استفاده بی رویه آنتی بیوتیک ها توجه جدی صورت گیرد. همچنین پیش از انتخاب آنتیبیوتیک درمانی، نسبت به انجام آزمون حساسیت آنتیبیوتیکی اقدام شود.
-
جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های شیر جمع آوری شده از گاوداری های سنتی شهرستان فامنین در سال 1400
1400چکیده ورم پستان تحت بالینی به دلیل کاهش میزان تولید و کیفیت شیر گاوها، منجر به خسارت های اقتصادی فراوانی در صنعت دامداری می شود. استافیلوکوکوس اورئوس از جمله باکتری های شایع و رایج در ایجاد ورم پستان تحت بالینی در گاوهای شیری می باشد. هدف از مطالعه اخیر بررسی میزان فراوانی استافیلوکوکوس اورئوس در شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان تحت بالینی در گاوداری های سنتی شهرستان فامنین بود. در این مطالعه، تعداد 103 نمونه شیر از هفت گاوداری سنتی شهرستان فامنین اخذ شد و در کنار یخ به آزمایشگاه میکروبیولوژی دانشکده پیرادامپزشکی انتقال یافت. ابتدا تست ورم پستان کالیفرنیا (CMT: California Mastitis Test) برای همه نمونه های شیر انجام گرفت. سپس بر اساس روش های کشت و آزمون های بیوشیمیایی، جداسازی و تشخیص اولیه استافیلوکوکوس اورئوس انجام گرفت و در نهایت برای تایید هویت جدایه های مذکور، شناسایی ژن femA با استفاده از آزمون PCR انجام گرفت. از مجموع 103 گاو شیری نمونه برداری شده، 26 مورد (25%) با استفاده از آزمون CMT به عنوان گاوهای مبتلا به ورم پستان تحت بالینی تشخیص داده شدند. همچنین نتایج کشت باکتریایی 60 نمونه شیر (58%)، بر روی بلادآگار مثبت بود که 36 مورد (60%)، کوکسی های گرم مثبت بودند. با استفاده از آزمونهای بیوشیمیایی، 9 جدایه (15%) از کوکسی های گرم مثبت، به عنوان گونه استافیلوکوکوس اورئوس شناسایی شدند که هویت تمامی آنها با استفاده از روش PCR نیز تایید گردید. نتایج این مطالعه نشان داد که میزان ورم پستان تحت بالینی در گاوداری های سنتی فامنین نسبتا بالا میباشد. علی رغم اینکه فراوانی نمونههای شیر آلوده به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس کمتر از 10 درصد (73/8%) بوده است، آلودگی باکتریایی این نمونهها حدود 60% بوده است، لذا پیشنهاد میشود راهکارهای پیشگیرانه و درمانی موثر تری به منظور جلوگیری از خسارت های این بیماری در نظر گرفته شود.
-
بررسی ملکولی حضور ژن های ARIr، csgD و pgaC دخیل در تشکیل بیوفیلم در اشریشیا کلی های بیماری زای پرندگان جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز در مرغداری های استان همدان
1400هر نوع عفونت موضعی یا سیستمیکی که به صورت کامل یا جزئی توسط اشریشیا کلی پاتوژنیک پرندگان ایجاد شود، اشاره به کلی باسیلوز دارد که این سندروم شامل کلی سپتی سمی، کلی گرانولوما، التهاب کیسه های هوایی، سندرم سر متورم، التهاب صفاق، التهاب مجرای تخم بر، التهاب مایع مفصلی، عفونت کیسه زرده، و التهاب روده می باشد. بیشتر اشریشیا کلیهای پاتوژنیک پرندگان از نوع اشریشیاکلی بیماری زای خارج روده ای محسوب می شوند. بیماری از طریق آب و غذای آلوده به مدفوع و ترشحات پرندگان بیمار منتـقل می شود. عوامل و مکانیسم های مختلف در حدت و پاتوژنز اشریشیا کلی پاتوژنیک پرندگان در ایجاد کلی باسیلوز طیور نقش دارند که عبارتند از: کپسول، آندوتوکسین، ساختارهای مسول کلونیزه شدن باکتری، چسبنده ها، اینتیمین، پروتئین ها، سیستم های جذب آهن، سموم و توانایی تشکیل بیوفیلم. بیوفیلم جمعیتی از میکروارگانیسم های متصل به یک سطح هستند که سلول های موجود در بیوفیلم دارای توانایی بیشتر انتقال ژن های حدت و مقاومت بیشتر در برابر عوامل ضد میکروبی هستند. در این مطالعه میزان فراوانی حضور سه ژن دخیل درتشکیل بیوفیلم شامل: ژن های pga که برای تشکیل بهینه بیوفیلم تحت شرایط مختلف رشد باکتری ضروری هستند، ژن csg کد کننده ی کورلی فیمبریا که امکان اتصال باکتری به سطوح غیر جاندار را از طریق افزایش برهم کنش سلول به سطح فراهم می کند و همچنین مسئول ارتباط سلول به سلول می باشد و ژن ariR که در تشکیل، رشد، و ثبات بیوفیلم نقش دارد با استفاده از روش Multiplex PCR بررسی شد. نتایج این مطالعه نشان داد که از 100 ایزوله اشریشیا کلی جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به بیماری کلی باسیلوز، 77 ایزوله درای ژن pgaC، 95 ایزوله دارای ژن csgD و 92 ایزوله دارای ژن AriR هستند. با توجه به فراوانی بالای حضور این ژن ها در اشریشا کلی های بیماری زای پرندگان و همچنین نقش مهم این ژن ها در تشکیل بیوفیلم احتمالا ژن های مذکور در افزایش قدرت بیماری زایی این سویه ها نقش مهمی را ایفا می کنند.
-
ارزیابی آزمایشگاهی فعالیت ضدباکتریایی برخی از ترکیبات هتروسیکلی جدید برعلیه چند گونه از باکتری های گرم مثبت و گرم منفی
1399چکیده: امروزه مقاومت آنتی بیوتیکی در بین سویه های باکتریایی یکی از مشکلات اصلی در درمان و کنترل عفونت ناشی از این میکروارگانیسم ها شناخته شده و به عنوان یک نگرانی جدی مطرح می باشد. به همین دلیل تلاش برای کشف و یا سنتز ترکیبات جدیدی که بتوان از آنها برای مبارزه بر علیه باکتری ها استفاده کرد، به طور مداوم در جریان است. از جمله مواد شیمیایی که ممکن است اثر ضدباکتریایی داشته باشند، می توان به ترکیبات هتروسیکلی اشاره کرد. هتروسیکل ها، ترکیبات آلی شناخته شده ای هستند که دارای ساختمان حلقوی متشکل از کربن و عناصر دیگر از قبیل نیتروژن ، اکسیژن و گوگرد می باشند. این ترکیبات به دلیل داشتن ساختمان قابل تغییر و منعطف مولکولی، در بسیاری از سنتز های آلی و داروسازی به خدمت گرفته می شوند. از طرفی باکتری ها، به عنوان شایع ترین عامل آلودگی فراورده های خونی محسوب می شوند. اگرچه ممکن است آلودگی باکتریایی در همه فراورده های خونی مشاهده شود ولی یکی از معضلات اصلی، آلودگی پلاکت هاست زیرا در دمای اتاق نگهداری شده و منبع مناسبی جهت رشد باکتری ها هستند. احتمال آلودگی باکتریایی پلاکت باعث شده که این محصول مدت زمان نگهداری کوتاهی داشته باشد و در نتیجه ذخایر آن کاهش یابد. به همین دلیل، مطالعه حاضر با هدف بررسی اثرات ضدمیکروبی چندین نوع از ترکیبات شیمیایی صورت پذیرفت. بدین منظور، ابتدا خاصیت ضدباکتریایی بیش از 100 ترکیب هتروسیکلی از جمله PE1, PE2, IN-3OH, IN-3P, LN-4P, LN-3P, LN-V, TE-3P, C1, C13 و . . . بر علیه باکتری های استافیلوکوکوس ارئوس، سودوموناس آئروژینوزا، اشریشیاکلی و سالمونلا تیفی موریوم با روش انتشار دیسک مورد بررسی قرار گرفت و در ادامه از آزمون های MIC/MBC جهت تعیین حداقل غلظت های ممانعت کننده از رشد و کشنده باکتری استفاده شد. در نهایت با توجه به نتایج بدست آمده، تاثیر ترکیباتی که اثر ضدباکتریایی مطلوبی نشان دادند، در مهار رشد باکتری استافیلوکوکوس ارئوس در کیسه های حاوی پلاکت که بطور تجربی با این باکتری آلوده شده بودند، با سه روز پایش روزانه و انجام تست های کنترل کیفی سلامت و عملکرد پلاکت ها مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که از میان ترکیبات آزمایش شده، تنها ترکیب PE1 بر روی باکتری استافیلوکوکوس ارئوس، به عنوان شایع ترین باکتری عامل آلودگی های باکتریایی فرآورده های پلاکتی، اثر ض
-
بررسی حضور تعدادی از ژن های حدت ( stx1، stx2، iss و sitA sitA,stx1,stx2 ,iss) در اشریشیا کلی های جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان
1399چکیده: بیماری ورم پستان که عبارت است از التهاب بافت پستانی به دلایل مختلفی از جمله باکتری ها ایجاد می شود. باکتری اشریشیا کلی پاتوژن محیطی غالب است و به طور معمول در پستان گاو تشکیل کلنی داده و بعنوان یک عامل خطر درایجاد ورم پستان محسوب می شود. در اشریشیا کلی بیماری زا تعدادی ژن کد کننده فاکتور های حدت مانند stx1، stx2، iss و sitA وجود دارد، که در بیماری زایی باکتری نقش مهمی دارند. هدف از انجام این مطالعه بررسی حضور ژن های حدت stx1، stx2، iss و sitA در اشریشیا -کلی های جدا شده از شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان بود. روش کار: در این مطالعه 67 نمونه اشریشیا کلی که توسط تست مولکولی واکنش زنجیره پلیمراز با جستجوی ژن phoA مورد تایید هویت قرار گرفتند، با استفاده از تکنیک MultiPlex PCR PCR حضور ژن های حدت stx1، stx2، iss و sitA مورد بررسی قرار گرفت. نتایج: از 67 جدایه، 29 جدایه (28/43%) دارای ژن sitA،23 جدایه (32/34%) دارای ژن iss، 4 جدایه (97/5%) دارای ژن stx2 و یک جدایه (49/1%) دارای ژن stx1 بودند. از 67 جدایه مورد آزمایش تعداد 17 جدایه (37/25%) فقط دارای یک ژن بودند، که 11 جدایه (91/17%) فقط ژنsitA ، 5 جدایه (95/8%) دارای ژن iss و یک جدایه (49/1%) دارای ژن stx2 بودند. تعداد 15 جدایه (38/22%) دارای دو ژن iss و sitA با هم بود. تعداد 2 جدایه (98/2%) دارای سه ژن stx2، iss و sitA با هم بودند و تعداد یک جدایه (49/1%) دارای چهار ژن stx1، stx2، iss و sitAبا هم بودند. نتیجه گیری نهایی: نتایج این بررسی نشان داد که دو ژن حدت iss و sitA بیشترین فراوانی در جدایه ها نسبت به دو ژن حدت stx1 و stx2 داشت لذا این دو ژن حدت بترتیب در مقاومت نسبت به سرم و فراهم کردن آهن برای باکتری اشریشیا کلی نقش اصلی را دارند و باعث ایجاد ورم پستان که منجر به تحمیل خسارت اقتصادی به صنعت شیر می گردد.
-
جستجوی مولکولی تعدادی از ژن های کد کننده انتروتوکسین در استافیلوکوکوس اورئوس جداشده از نمونه های شیر گاو در همدان
1399چکیده: ورم پستان گاوی سال ها ست که از مسائل مهم گله های شیری است، زیرا، ورم پستان یک بیماری خطرناک در گله های شیری است که به دلیل حذف دام مبتلا، مرگ و میر، هزینه های دامپزشک و به دلیل اثرات منفی بر کیفیت و مقدار شیر، ضرر اقتصادی جهانی داشته است. عوامل مختلفی می توانند باعث ایجاد ورم پستان گاو شوند مانند باکتری، قارچ، ویروس، ضربه و آلرژی. باکتری استافیلوکوکوس اورئوس از جمله میکروارگانیسم های است که بیشتر با ورم پستان گاو همراه است. این باکتری نه تنها باعث ورم پستان گاو می شود، بلکه باعث مسمومیت غذایی در انسان نیز می گردد. استافیلوکوکوس اورئوس می تواند چندین عامل حدت تولید کند که انتروتوکسین ها از مهمترین عوامل حدت این باکتری محسوب می شوند و انتروتوکسین های باکتری استافیلوکوکوس اورئوس به دلیل مصرف مواد غذایی مانند شیر و لبنیات، ممکن است به شیوع مسمومیت منجر شوند. هدف این مطالعه، بررسی حضور ژن های کد کننده انتروتوکسین های A، C و E در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان است. 43 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از شیر ورم پستان گاو برای تشخیص حضور ژن های کد کننده انتروتوکسین های A، C و E با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز تکی (Singleplex PCR) مورد ارزیابی قرار گرفتند. در مطالعه حاضر، در بین جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس حضور ژن sea در 15 (88/34 %) جدایه شناسایی شد در حالیکه حضور ژن های sec و see در هیچ کدام از جدایه تشخیص داده نشد. نتایج این مطالعه نشان داد که ژن کد کننده انتروتوکسین ها در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس شناسایی شده در نمونه های شیر ورم پستان حضور دارند و انتروتوکسین های استافیلوکوکوس اورئوس موجود در مواد غذایی مانند شیر و لبنیات خطرات بالقوه بهداشت عمومی هستند. وجود جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس تولید کننده انتروتوکسین مقاوم به حرارت در شیر گاو به این معنی است که شیر می بایست قبل از مصرف حرارت مناسب دیده ونیز جهت کنترل حضور استافیلوکوکوس اورئوس در شیر، اقدامات مدیریتی و بهداشتی به شکل موثری لازم است.
-
جستجوی مولکولی تعدادی از ژن های کد کننده انتروتوکسین در استافیلوکوکوس اورئوس جداشده از نمونه های انسانی و مواد غذایی در همدان
1399چکیده: استافیلوکوکوس اورئوس فلور طبیعی بدن انسان یا حیوان و بیشتر مرتبط با عفونت های بیمارستانی و اکتسابی از اجتماع است که در بیماران دارای نقص ایمنی می تواند کشنده باشد و عفونت شدید بیمارستانی ایجاد کند. این باکتری به صورت گسترده ای در محیط پراکنده است و به طریق مختلف سبب آلودگی مواد غذایی می شود. این باکتری می تواند توکسین تولید کند. انتروتوکسین ها مقاوم به حرارت و سوپر آنتی ژن هستند. انتروتوکسین استافیلوکوکوس اورئوس مهمترین فاکتور بیماریزای دخیل در مسمومیت های غذایی استافیلوکوکوس است. هدف از این مطالعه، شناسایی ژنهای کد کننده انتروتوکسینsea ، sec و see در استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از نمونه های مواد غذایی و انسانی در شهر همدان به روش PCR است. 81 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس که 47 جدایه از مواد غذایی و 34 جدایه از انسانی جهت جستجوی حضور ژن های کد کننده انتروتوکسین sea، sec و see به روش PCR مورد بررسی قرار گرفت. در نتایج آزمون PCR حضور ژن های sea، sec و see مورد بررسی در 47 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس از مواد غذایی، تعداد 15 جدایه (91/31 %) واجد ژن sea، 3 جدایه (38/6 %) واجد ژن sec، 2 جدایه (25/4 %) واجد ژن see، 1 جدایه (12/2 %) حاوی ژن های sea و sec باهم و 2 جدایه (25/4 %) حاوی ژن های sea و see باهم بودند. در 34 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس انسانی، تعداد 21 جدایه (76/61-%) حاوی ژن sea، 2 جدایه (88/5 %) حاوی ژن sec، 17 جدایه (50 %) حاوی ژن see، 1 جدایه (94/2 %) حاوی ژن های sea و sec باهم و 16 جدایه (05/47 %) حاوی ژن های sea و secباهم بودند. به طور کلی حضور استافیلوکوکوس اورئوس در نمونه های مواد غذایی و انسانی، بویژه سویه های انتروتوکسیژنیک، می تواند یک خطر بالقوه برای سلامتی محسوب می شود.
-
بررسی حضور ژنهای عامل حدت (fimC، iutA، hlyA و cvaA/B) در اشریشیا کلی های جدا شده ازگاوهای مبتلا به ورم پستان
1399ورم پستان در گاو، یک معضل محسوب می شود. عوامل ورم پستان واگیر دار و محیطی می باشد که اشریشیا کلی جزء عوامل محیطی می باشد. باکتر ی اشریشیا کلی دارای عوامل حدت بسیاری می باشد. این مطالعه با هدف بررسی حضور ژن های عامل حدت fimC، iutA، hlyA و cvaA/B در اشریشیا کلی مولد ورم پستان انجام شده است. در این مطالعه تعداد 67 جدایه باکتری اشریشیا کلی از گاوهای مبتلا به ورم پستان پس از تایید مولکولی هویت جدایه ها با آزمایش PCR برای جستجوی حضور ژن phoA ، جهت بررسی حضور ژن های حدت fimC، iutA، hlyA و cvaA/B با روش MultiplexPCR مورد ارزیابی قرار گرفت. که67 جدایه (100 %) دارای ژن fimC، 16 جدایه (8/23 %) دارای ژن hlyA، 11 جدایه (42/16 %) دارای ژن cvaA/B و 11جدایه (42/16 %) دارای ژن iutA بودند. از 67 جدایه مورد آزمایش تعداد 40 جدایه ( 7/59 %) فقط دارای یک ژنfimC بودند. تعداد 18 جدایه (8/26 %) فقط دارای دو ژن با هم، تعداد 7 جدایه ( 4/10 %) دارای سه ژن با هم و تعداد 2 جدایه (9/2 %) دارای چهار ژن توام بودند. تمام جدایه ها دارای ژن fimC بودند که نشان دهنده حضور موثر فیمبریه نوع 1 در حدت اشریشیا کلی می باشد. ارتباط معنی داری در حضور توام ژنها به دست نیامد. نتیجه گیری: چنین به نظر می رسد که تنها سویه های ویژه ای از اشریشیا کلی بطور ذاتی دارای فاکتور حدت می باشند. فاکتورهای حدت، اشریشیا کلی را قادر می سازد تا بیماری ایجاد کند. بیماری ورم پستان که آنها ایجاد می کنند، خارج روده ای می باشد و منجر به این فرضیه می شود که فاکتورهای حدت منجر به ماندگاری اشریشیا کلی در محیط خارج روده ای می گردد.
-
تاثیر نانو کپسوله کردن انروفلوکساسین بر روی فعالیت ضد باکتریایی آن علیه تعدادی از باکتری های گرم مثبت و منفی
1399چکیده: انروفلوکساسین متعلق به نسل سوم فلوروکینولونها بوده و دارای طیف اثر بالا است. فلوروکینولونها خود زیر خانواده کینولون ها به حساب میآیند. اولین کینولون، نالیدیکسیک اسید است که از سال 1980 در حیوانات مورد استفاده قرارگرفته است. انروفلوکساسین بر باکتری های گرم مثبت و منفی موثر بوده ولی در برابر باکتری های بیهوازی بیتاثیر است. انروفلوکساسین با تاثیر بر روی پروتئین های توپوایزومراز مانع پیچش بیشتر در DNA باکتریها شده و باعث تغییر در توپولوژی DNA می گردد که بر این اساس جزء آنتی بیوتیک های کشنده باکتری ها (Bactericidal) محسوب میشوند. فنآوری نانو، فرصتی عالی برای درمان عفونت های میکروبی مقاوم به دارو فراهم می کند. نانو مواد خصوصیات منحصربه فردی دارند و فعالیت ضدمیکروبی ذاتی برخی از آنها نیز ثابت شده است. علاوه بر آن استفاده از سیستم های جدید نانو ساختار برای تحویل آنتی بیوتیک ها در بهبود فارماکوکینتیک دارو و کاهش اثرات جانبی آن بسیار موردتوجه قرارگرفته است. چکیده: انروفلوکساسین متعلق به نسل سوم فلوروکینولون ها بوده و دارای طیف اثر بالا است. فلوروکینولون ها خود زیر خانواده کینولون ها به حساب میآیند. اولین کینولون، نالیدیکسیک اسید است که از سال 1980 در حیوانات مورد استفاده قرارگرفته است. انروفلوکساسین بر باکتری های گرم مثبت و منفی موثر بوده ولی در برابر باکتری های بیهوازی بیتاثیر است. انروفلوکساسین با تاثیر بر روی پروتئین های توپوایزومراز مانع پیچش بیشتر در DNA باکتریها شده و باعث تغییر در توپولوژی DNA می گردد که بر این اساس جزء آنتی بیوتیک های کشنده باکتری ها (Bactericidal) محسوب میشوند. فنآوری نانو، فرصتی عالی برای درمان عفونت های میکروبی مقاوم به دارو فراهم می کند. نانو مواد خصوصیات منحصربه فردی دارند و فعالیت ضدمیکروبی ذاتی برخی از آنها نیز ثابت شده است. علاوه بر آن استفاده از سیستم های جدید نانو ساختار برای تحویل آنتی بیوتیک ها در بهبود فارماکوکینتیک دارو و کاهش اثرات جانبی آن بسیار موردتوجه قرارگرفته است. در این مطالعه تعداد 6 نمونه که عبارتند از هیدروژل کیتوسان – انروفلوکساسین 1 درصد – تری پلی فسفات سدیم، هیدروژل کیتوسان – انروفلوکساسین 5/0 درصد – تری پلی فسفات سدیم، محلول کیتوسان – انروفلوکساسین 5/0 درصد، محلول استاندارد انروفلوکساسین 1 درصد، محلول استا
-
ﺑﺮرﺳﯽ اﻟﮕﻮی ﻣﻘﺎوﻣﺖ آﻧﺘﯽ ﺑﯿﻮﺗﯿﮑﯽ در اﺷﺮﯾﺸﯿﺎﮐﻠﯽ ﻫﺎی ﺟﺪا ﺷﺪه از ﺟﻮﺟﻪ ﻫﺎی ﮔﻮﺷﺘﯽ ﻣﺸﮑﻮک ﺑﻪ ﮐﻠﯽﺑﺎﺳﯿﻠﻮز در ﻣﺮﻏﺪاری ﻫﺎی ﮔﻮﺷﺘﯽ اﺳﺘﺎن ﻫﻤﺪان
1399باکتری اشریشیا کلی جزء فلور طبیعی دستگاه گوارش انسان، پستانداران و پرندگان است که عموماً بعنوان یک بیماری زای فرصت طلب محسوب می شود و حدود 15 درصد از جمعیت این باکتری را سویه های بیماری زا برای پرندگان تشکیل می دهند. هدف از انجام این مطالعه بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در اشریشیا کلی های جدا شده از جوجه-های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز در مرغداری های گوشتی استان همدان بود. در مطالعه حاضر تعداد 100 نمونه از اشریشیا کلی های جدا شده از طیور مشکوک به کلی باسیلوز در مرغداری های استان همدان که در مطالعه قبلی جداسازی، شناسایی، تایید هویت و نگهداری شده بود مورد بررسی قرار گرفتند. در مطالعه فنتوتیپی به بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی به روش انتشار دیسک پرداخته و سپس در بررسی ژنوتیپی با استخراج DNA از نمونه ها و انجام تکنیک PCR حضور 5 ژن مقاومت آنتی بیوتیکی شامل: tetA، qnrA،sul1، blaTEM و dfrA1like در ایزوله ها مورد بررسی قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد بیشترین مقاومت آنتی بیوتیکی با استفاده از روش انتشار دیسک به ترتیب نسبت به آنتی بیوتیک های پنی سیلین(89%)، فلومکوئین(86%)، تتراسایکلین(85%)، انروفلوکساسین(82%)، کوتریماکسازول(74%)، سولتریم(71%)، کلرامفنیکل(68%) و سیپروفلوکساسین(64%) مشاهده شد. .در بررسی ملکولی میزان حضور ژن های مقاومت tetA، sul1، dfrA1like و blaTEM به ترتیب 6268%، 63%، 51% و 30% گزارش شد. . نتایج این مطالعه نشان داد که مقاومت نسبت به اکثر آنتی بیوتیک های رایج در صنعت طیور ایران گسترده و بالا می باشد که لزوم اجرای طرح پایش ملی برای تعیین مقاومت ضدمیکروبی ضروری به نظر می رسد. همچنین با بررسی تنوع و فراوانی الگوی مقاومت دارویی جدایه های یک منطقه می توان درخصوص انتخاب آنتی بیوتیک های مناسب و موثر برای درمان کلی باسیلوز اطلاعات دقیقی بدست آورد تا از گسترش ژن های مقاومت و در نتیجه افزایش مقاومت آنتی بیویتکی در باکتری ها جلوگیری نمود.
-
جستجوی مولکولی کوکسیلا بورنتی در نمونه های شیر گله های گوسفند در شهرستان دورود
1398ﻛﻮﻛﺴﻴﻼ ﺑﻮرﻧﺘﻲ یک باکتری داخل سلولی اجباری و ﻋﺎﻣﻞ ﻣﺴﺒﺐ ﺗﺐ ﻛﻴﻮ در اﻧﺴﺎن و ﺣﻴﻮاﻧﺎت اﺳﺖ. حیوانات اهلی مثل ﮔﺎو، ﮔﻮﺳﻔﻨﺪ و ﺑﺰ ﻣﺨﺎزن اﺻﻠﻲ ﻋﻔﻮﻧﺖ ﺑﺮای اﻧﺴﺎن ﻣﻲ ﺑﺎﺷﻨﺪ. آلودگی با کوکسیلا بورنتی در حیوانات بیشتر بدون علائم است، اما می تواند سبب سقط جنین، زایمان زودرس، ناباروری و عفونتهای رحمی بشود و به دنبال آن تعداد زﻳﺎدی ﺑﺎﻛﺘﺮی در ادرار، ﻣﺪﻓﻮع، ﺷﻴﺮ و ﻧﻴﺰ از ﻃﺮﻳﻖ ﺟﻔﺖ و ﻣﺎﻳﻌﺎت ﺟﻨﻴﻨﻲ دﻓﻊ ﻣﻲ شود. هدف از انجام این مطالعه بررسی وضعیت شیوع کوکسیلا بورنتی در شیر گوسفندان اطراف شهر دورود بوده است. در این مطالعه 96 نمونه شیر گوسفند از 8 منطقه واقع در شهرستان دورود در طی چهار فصل و هر فصل 24 نمونه جمع آوری و برای انجام تست های آزمایشگاهی به دانشکده پیرادامپزشکی دانشگاه بوعلی سینا انتقال یافت. ابتدا با استفاده از تست ورم پستان کالیفرنیا (CMT) و شمارش سلول های سوماتیک (SCC)، احتمال وجود ورم پستان تحت بالینی مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه بعد از استخراج DNAی تام کل نمونه های شیر، شناسایی مولکولی کوکسیلا بورنتی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی (Trans 1, Trans 2) با آزمون PCR Trans - انجام شد. نتایج مطالعه شیوع کوکسیلا بورنتی در فصول مختلف متفاوت بود. با توجه به جداول آمار توصیفی در مورد کل داده های گردآوری شده در فصول و مناطق مختلف مشاهده شد که 17/79 درصد نمونه ها منفی و 83/20 درصد آن ها مثبت بود. میزان آلودگی در فصل بهار و زمستان نسبت به نمونه های فصول پاییز و تابستان بیشتر بود، شیوع عفونت کوکسیلا بورنتی در فصول مختلف، ارتباط معنی داری مشاهده شد (05/0> P). از نظر تست CMT، 62/15 درصد و SCC، 25 درصد نمونه های شیر با امتیاز بالا بودند. همچنین در این مطالعه ارتباط بین سن، تعداد شکم زایش دام، شاخص های CMT و SCC با میزان شیوع کوکسیلا بورنتی مورد بررسی قرار گرفت که ارتباط معنی داری مشاهده نشد (05/0 < P). نتایج این مطالعه شیوع نسبتاً بالا کوکسیلا بورنتی در جمعیت گوسفند در این منطقه از کشور را نشان داد. شیر گوسفند می تواند یکی از منابع بالقوه تب کیو در ایران باشد.
-
جستجوی مولکولی کوکسیلا بورنتی در نمونه های شیر گله های بز در شهرستان بروجرد
1398تب کیو یک بیماری مشترک بین انسان و دام می باشد، که عامل آن باکتری ریکتزیائی،داخل سلولی اجباری به نام کوکسیلا بورنتی است. گاو، گوسفند و بز مخازن اصلی عفونت برای انسان می باشند. حیوانات آلوده تعداد بسیار زیادی باکتری را در ادرار، مدفوع، شیر و نیز از طریق جفت و مایعات جنینی دفع می کنند. هدف از مطالعه حاضر جستجوی مولکولی کوکسیلابورنتی در نمونه های شیر گله های بز در شهرستان بروجرد بود. در این مطالعه، 96 نمونه شیر بز از 7 گله بز واقع در شهرستان بروجرد جمع آوری و برای انجام تست های آزمایشگاهی به دانشکده پیرادامپزشکی دانشگاه بوعلی سینا انتقال یافت. در ادامه بعد از استخراج DNA از نمونه های شیر، شناسایی کوکسیلابورنتی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی Trans1 , 2با آزمون Trans- PCRانجام شد. در این مطالعه 26 نمونه(08/27درصد) از 96 نمونه شیر بزهای مورد مطالعه (13/36-03/18 درصد با فاصله اطمینان 95 درصد) در آزمون PCRآلودگی با DNA کوکسیلابورنتی داشتند. آلودگی درنمونه های شیر بز ارتباط معنی دار با فصل سال داشت (05/0>p). میزان آلودگی با شکم زایش و سن بزها ارتباط معنی داری نداشت (05/0<.(p نتایج مطالعه حاضر نشان داد که عفونت ناشی از کوکسیلا بورنتی در گله های بز شهرستان بروجرد وجود دارد و بنابراین دامداران و مسئولان ذیربط باید اقدامات موثری را جهت کنترل و یا پیشگیری از این عفونت ها انجام دهند.
-
مطالعه میزان آلودگی کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس در گوسفندان کشتاری کشتارگاه صنعتی دام همدان در سال 1397 و 1398
1398بیماری لنفادنیت کازئوز عامل ضررهای اقتصادی به تولیدکنندگان گوسفند و بز در سرتاسر جهان می باشد. عامل بیماریکورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس بوده که یک پاتوژن داخل سلولی اختیاری است و می تواند داخل فاگوسیت ها زنده مانده و رشد نماید. کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس باکتری میله ای گرم مثبت، بدون اسپور، بی هوازی اختیاری، کاتالاز مثبت، اکسیداز منفی، بدون کپسول، ژلاتین منفی، اوره آز مثبت بوده و کلنی های آن در بلاد آگارکوچک، سفید و خشک می باشد. در مطالعه حاضر به منظور بررسی میزان آلودگی گوسفندان کشتار شده در کشتارگاه صنعتی دام همدان به کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس تعداد 400 نمونه به صورت تصادفی (از تعداد 200 لاشه گوسفند نر و ماده و از عقده های لنفاوی پیش کتفی و مدیاستن) و در چهار فصل سال نمونه برداری شده و سپس بوسیله روش های بیوشیمیایی از نمونه های اخذ شده (نمونه های اخذ شده شامل لاشه های فاقد و یا دارای علائم کشتارگاهی بیماری لنفادنیت چرکی می باشند) پس از انجام کشت های لازم باکتریهای کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس مشکوک جداسازی و ذخیره گردید. در مرحله بعد و پس از اتمام نمونه برداری تعداد 33 مورد جدایه مشکوک کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس به روش مولکولی Multiplex PCR تایید هویت شد و مشخص گردید که گوسفندان کشتار شده در کشتارگاه صنعتی دام همدان به صورت میانگین 12% آلوده به باکتری کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس می باشند. این مساله نشان می دهد که آلودگی کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس در منطقه وجود دارد و مزارع پرورش گوسفند باید مورد مطالعه قرار گرفته و پرورش دهندگان گوسفند و مراکز مسئول، از خسارات و خطرات بهداشتی ناشی از این بیماری مطلع گردند تا بتوان گام-های موثری در جهت پیشگیری، کنترل و یا حتی ریشه کنی این بیماری انجام داد.
-
جستجوی مولکولی ژن های مقاومت آنتی بیوتیکی (ژن های blaTEM، qnrA و aadA) بر علیه بتالاکتام ها، انروفلوکساسین و استرپتومایسین در سویه های اشریشیا کلی جدا شده از نمونه های ورم پستان بالینی گاو
1398داروهای ضد میکروبی از جمله معروفترین داروها هستند که در صورت استفاده درست از این داروها نجات بخش خواهند بود و استفاده نادرست و نابجا، باعث افزایش هزینه، ایجاد عوارض و بروز مقاومت دارویی می گردد. مقاومت باکتریایی زمانی ایجاد می شود که تجویز یک آنتی بیوتیک خاص با دز معمول در بدن یا در محیط کشت قادر به از بین بردن یا مهار رشد یک سویه باکتریایی نباشد. این موضوع از جنبه عدم موفقیت در درمان بیماری های عفونی و از نظر مسائل اقتصادی بسیار اهمیت دارد. باکتری اشریشیاکلی از جمله پاتوژن های مشترک بین انسان و دام است که از عوامل ایجاد ورم پستان در گاو می باشد. بیماری ورم پستان، به عنوان پرهزینه ترین بیماری گاو شیری در دنیا شناخته شده است. درمان این بیماری عمدتاً براساس آنتی بیوتیک درمانی بوده و این امر باعث شده که یکی از معمول ترین علت استفاده از آنتی بیوتیک ها در گاوداری های شیری، درمان این بیماری باشد. مقاومت باکتری های مولد ورم پستان به آنتی بیوتیک های معمول باعث عدم درمان گاوهای مبتلا و گسترش بیماری در گله شده و نیاز به استفاده از آنتی بیوتیک های دیگر را به دنبال دارد. مطالعه حاضر بر روی67جدایه اشریشیا کلی که در مطالعات قبلی از نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان جدا شده و هویت آنها از نظر فتوتیپی و ژنوتیپی تایید شده بود، صورت گرفت. بدین منظور ابتدا جدایه ها با استفاده از محیط های کشت غنی کننده احیاء شدند و سپس DNA آنها با استفاده از روش جوشاندن استخراج گردید. در ادامه با استفاده از تکنیک PCR به بررسی حضور ژن های مقاومت آنتی بیوتیکی blaTEM، qnrA و A aad در این جدایه ها پرداخته شد و در انتها داده های بدست آمده به روش توصیفی تحلیل گردید. بر اساس نتایج الکتروفورز محصولات ) PCR حاصل از استخراج DNA) و براساس روش توصیفی، از تعداد 67 ایزوله اشریشیا کلی جدا شده از نمونه های ورم پستان بالینی گاو، تعداد 11 جدایه دو ژن aadAو blaTEM و 14 جدایه فقط ژن blaTEM و 12 جدایه تنها ژن aadAو 28جدایه هیچ یک از ژن های مقاومت را نداشتند. هیچ جدایه ای از جدایه های اشریشیاکلی دارای ژن qnrA نبود. همچنین بر اساس نتایج الکتروفورز محصولات PCR (حاصل از استخراج پلاسمید جهت جسجوی ژن qnrA) هیچ جدایه ای واجد باند موردنظر نبود.
-
تعیین گروههای فیلوژنیک اشریشیا کلی بیماریزای پرندگان ( APEC Avian Pathogen Escherichia coli) جدا شده از جوجههای گوشتی مشکوک به بیماری کلیباسیلوز در مرغداریهای صنعتی استان همدان
1398کلیباسیلوز به هر گونه عفونت موضعی یا سیتمیک ناشی از اشریشیا کلی اطلاق میشود که معمولا به عنوان بیماری ثانویه زمانیکه سیستم دفاعی میزبان ضعیف است اتفاق میافتد.سندرمهای ناشی از کلیباسیلوزشامل: کلیگرانولوما، التهاب صفاق، التهاب مجاری تخم، عفونت کیسه زرده والتهاب روده میباشد. اشریشیا کلی باکتری گرم منفی است که به عنوان عامل اصلی کلیباسیلوز شناخته میشود. به علاوه ، این باکتری یکی از عوامل اصلی بیماریهای انسانی نیز میباشد. اشریشیا کلی دارای 7گروه فیلوژنیک است که شامل: گروه A، B1، B2،C، D، E وFمیباشد. فیلوتایپینگ اشریشیا کلی یک روش مناسب برای ارزیابی نوع پراکندگی گروههای فیلوژنیک در مناطق مختلف است. این مطالعه به منظور تعیین گروههای فیلوژنیک اشریشیا کلی جدا شده از جوجههای گوشتی مشکوک به کلیباسیلوز در مرغداریهای استان همدان انجام شده است.در این مطالعه گروههای فیلوژنیک 100 ایزوله اشریشیا کلیجدا شده از جوجههای گوشتی مشکوک کلی باسیلوز و 100 ایزوله جدا شده از جوجههای سالم با استفاده از روش Quadriuplex PCR تعیین گردید. در بین 100 اشریشیا کلی جدا شده از جوجههای سالم،49%، 27%، 5%، 3%، 5%، 1%، 6%، 1%، 3% به ترتیب در گروههای فیلوژنتیکیU، E، D، C، A، Clade I، B1،B2، F و در بین 100 اشریشیا کلی جوجههای مشکوک به کلی باسیلوز،20%، 18%، 19%، 3%، 3%، 11%، 10%، 8%، 8% به ترتیب در گروههای فیلوژنیکU، D، E، C، A، Clade I، B1، B2 و F قرار گرفتند.نتایج نشان میدهد که اکثر جدایههای اشریشیا کلیمتعلق جوجههای مشکوک به کلی باسیلوز در استان همدان، در گروه فیلوژنیک Uواشریشیا کلیهای جدا شده از جوجههای سالم نیز در گروه فیلوژنیک Uقرار گرفتند.
-
ستجوی مولکولی مایکوپلاسما در نمونه های شیر گله های گوسفند در شهرستان دورود استان لرستان
1398جمعیت گوسفند در دامداری های کشور براساس نتایج رسمی مرکز آمار ایران در سال 1396 بیش از 40 میلیون راس در کشور بوده که بیشترین سهم از نظر تعداد نسبت به سایر دامها را به خود اختصاص داده است. این تعداد بیش از 5/2 برابر تعداد بز و بزغاله و 8 برابر تعداد گاو و گوساله در کشور است و این آمار اهمیت نگهداری و کنترل بیماری در گوسفندان را چندین برابر می کند. ﻗﺴﻤﺖ ﻋﻤﺪه ﺳﻮدﻣﻨﺪی ﭘـﺮورش ﮔﻮﺳـﻔﻨﺪ ﺑـﻪ ﺑـﺮه زاﻳﻲ ﻣﺮﺑﻮط اﺳـﺖ و ﻫﺮﮔﻮﻧﻪ اﺧﺘﻼل در آن ﻣﻮﺟﺐ ﻛﺎﻫﺶ ﺳﻮد و ﺧﺴﺎرات اﻗﺘﺼﺎدی ﻣﻲﺷﻮد. آﮔﺎﻻﮐﺴﯽ ﯾﮏ ﺑﯿﻤﺎری واﮔﯿﺮدار در ﮔﻮﺳﻔﻨﺪ و ﺑﺰ اﺳﺖ ﮐﻪ ﺿﺎﯾﻌﺎت آن در ﭘﺴﺘﺎن، ﭼﺸﻢ و ﻣﻔﺎﺻﻞ دام ﻣﺒﺘﻼ ﻇﺎﻫﺮ ﻣﯽﺷﻮد. اﮔﺮ ﭼﻪ اﮐﺜﺮ محققین ﺣﺴﺎﺳﯿﺖ ﺑﺰ را ﺑﯿﺸﺘﺮ از ﮔﻮﺳﻔﻨﺪ ﻣﯽ داﻧﻨﺪ، اﻣﺎ در اﯾﺮان ﻣﯿﺶﻫﺎ ﺑﯿﺸﺘﺮ از ﺑﺰﻫﺎ ﺑﻪ این ﺑﯿﻤﺎری ﻣﺒﺘﻼ ﻣﯽﺷﻮﻧﺪ. ﻋﺎﻣﻞ اﯾﻦ ﺑﯿﻤﺎری ﻣﺎﯾﮑﻮﭘﻼﺳﻤﺎ آﮔﺎﻻﮐﺘﯿﻪ است، ولی ﻋﻮاﻣﻞ دﯾﮕﺮ ﻣﺎﻧﻨﺪ ﻣﺎﯾﮑﻮﭘﻼﺳﻤﺎ ﻣﺎﯾﮑﻮﺋﯿﺪس، ﻣﺎﯾﮑﻮﭘﻼﺳﻤﺎ آرژﯾﻨﯿﻨﯽ، ﻣﺎﯾﮑﻮﭘﻼﺳﻤﺎ ﻣﺎﯾﮑﻮﺋﯿﺪس وارﯾﺘﻪ ﻣﺎﯾﮑﻮﺋﯿﺪس و ﻣﺎﯾﮑﻮﭘﻼﺳﻤﺎ ﭘﻮﺗﺮی ﻓﯿﺴﻨﺲ ﻧﯿﺰ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻋﻮاﻣﻞ ﺑﯿﻤﺎری ﺷﻨﺎﺧﺘﻪ ﺷﺪه اﻧﺪ. در این مطالعه، 96 نمونه شیر گوسفند از 8 منطقه واقع در شهرستان دورود استان لرستان جمع آوری و برای انجام تست های آزمایشگاهی به دانشکده پیرادامپزشکی دانشگاه بوعلی سینا انتقال یافت. ابتدا با استفاده از تست ورم پستان کالیفرنیا (CMT) و شمارش سلول های سوماتیک (SCC)، احتمال وجود ورم پستان تحت بالینی مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه بعد از استخراج DNAی تام کل نمونه های شیر، شناسایی جنس مایکوپلاسما با استفاده از پرایمرهای اختصاصی با آزمون PCR انجام شد. نتایج مطالعه نشان داد که از نظر تست CMT، 62/15 درصد و SCC، 25 درصد نمونه های شیر با امتیاز بالا بودند. همچنین در شناسایی مایکوپلاسما به روش PCR ، 12/3 درصد نمونه ها آلودگی به مایکوپلاسما را نشان داد. نتایج این مطالعه نشان داد که PCR می تواند بعنوان یک روش سریع و دقیق در شناسایی مایکوپلاسما از نمونه های شیر استفاده شود. با توجه به اینکه این باکتری یکی از عوامل مهم ورم پستان واگیر بوده و احتمال گسترش آن در سطح گله وجود دارد توصیه می شود اقدامات پیشگیرانه و کنترلی مناسبی جهت مبارزه با عفونت مایکوپلاسمایی اتخاذ گردد.
-
جستجوی مولکولی مایکوپلاسما در نمونه های شیر گله های بز در شهرستان بروجرد
1398مایکوپلاسماها باکتری های کوچک و فاقد دیواره سلولی هستند که عفونت های مختلفی را در حیوانات ایجاد می کنند .عفونت های مایکوپلاسمائی نشخوارکنندگان کوچک در بسیاری از کشورها به عنوان یک مسئله مهم مطرح است و سبب خسارت های اقتصادی فراوانی در صنعت دامداری می شود. هدف از مطالعه حاضر جستجوی مایکوپلاسما در نمونه های شیر گله های بز در شهرستان بروجرد بود. در این مطالعه، 96 نمونه شیر بز از 7 گله بز واقع در شهرستان بروجرد جمع-آوری و برای انجام تست های آزمایشگاهی به دانشکده پیرادامپزشکی دانشگاه بوعلی سینا انتقال یافت. ابتدا با استفاده از تست ورم پستان کالیفرنیا (CMT) و شمارش سلول های سوماتیک (SCC)، وضعیت ورم پستان تحت بالینی در دام ها مورد بررسی قرار گرفت. در ادامه بعد از استخراج DNAی از مخزن های شیر، شناسایی باکتری های جنس مایکوپلاسما با استفاده از پرایمرهای اختصاصی با آزمون PCR انجام شد. در نهایت نتایج مورد بررسی قرار گرفت. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که از نظر آزمون های CMT و SCC به ترتیب 25/31 و 3/7 درصد از نمونه های شیر با امتیاز بالا بودند. همچنین در شناسایی مایکوپلاسما به روش PCR نیز، 2/5 درصد نمونه ها (5 نمونه شیر) به باکتری مایکوپلاسما آلوده بودند. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که PCR می تواند بعنوان یک روش سریع و اختصاصی در شناسایی مایکوپلاسما از نمونه های شیر به کار رود. نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد که عفونت ناشی از مایکوپلاسماها در گله های بز شهرستان بروجرد وجود دارد و بنابراین دامداران و مسئولان زیربط باید اقدامات موثری را جهت کنترل و یا پیشگیری از این عفونت ها انجام دهند.
-
بررسی وجود فاکتورهای حدت fimC و cvaA/B در اشریشیا کلی های پاتوژنیک جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز
1398کلی باسیلوز پرندگان یک بیماری است که می تواند با سایر بیماری های خارج روده ای همراه باشد. عامل اصلی بیماری اشریشیا کلی های پاتوژنیک پرندگان (APEC) می باشد. بیماری زاییAPEC در ارتباط با سروگروپ ها و فاکتورهای حدتی است که به وسیله ژن های حدت مربوطه کد می شوند. در میان این ژن های حدت، ژن fimC نقش مهمی در بیوسنتز فیمبریه نوع یک دارد که در چسبندگی باکتری نقش دارد. اکثر سویه های APEC دارای پلاسمیدکلی سین هستند که به وسیله ی ژن cvaA/B کد گذاری می شوند. یکی دیگر از ژن های حدت، ژن iutA است، که آئروباکتین (نوعی سیدروفور) است. هدف از این مطالعه شناسایی ژن های حدت fimC، cvaA/B و iutA در اشریشیا کلی های پاتوژنیک جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز با استفاده از روش MultiPlex PCR بود. در این مطالعه 100 سویه باکتری اشریشیا کلی جدا شده از کلواک جوجه های گوشتی سالم و 100 سویه جدا شده از چهار بافت کیسه هوایی، کبد، کلواک و ترشحات نای جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز برای بررسی ژن های حدت مورد بررسی قرار گرفت. نتایج MultiPlex PCR نشان داد که از تعداد 100 اشریشیا کلی جدا شده از جوجه های سالم بررسی شده 24 جدایه هرسه ژن حدت، 54 جدایه دو ژن حدت iutA و fimC و 2 جدایه دو ژن حدت fimC و cvaA/B و 1 جدایه دو ژن حدت cvaA/B و iutA و 15 جدایه فقط ژن حدت fimC و 4 جدایه هیچ کدام از ژن های حدت را نداشتند. در بین اشریشیا کلی های جدا شده از جوجه های سالم بیشترین فراوانی مربوط به ژن fimC (95جدایه) و کمترین فراوانی مربوط به ژن cvaA/B (22 جدایه ) بود. از100 اشریشیا کلی جدا شده از جوجه های مشکوک به کلی باسیلوز 44 جدایه هر سه ژن حدت، 40 جدایه دو ژن حدت iutA و fimC و 9 جدایه دو ژن حدت iutA وcvaA/B و4 جدایه فقط یک ژن حدت iutA و 3 جدایه فقط یک ژن حدت fimC را داشتند. بیشترین تعداد ژن های حدت در این جدایه ها مربوط به ژن iutA )97%( و کمترین فراوانی مربوط به ژن cvaA/B )52% ) بود. براساس نتایج آماری بدست آمده و با استفاده از نرم افزار SPSS وآزمون مربع کای بین میزان حضور ژن iutA در اشریشیا کلی های جدا شده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز و اشریشیا کلی های جدا شده از جوجه های سالم تفاوت معنی دار آماری وجود داشت (000216/0P=) و ژن iutA به طور معنی داری در اشریشیا کلی های جدا شده از جوجه های گوش
-
بررسی تعدادی از عوامل حدت در باکتری اشریشیاکلی جداشده از جوجه های گوشتی مشکوک به کلی باسیلوز در مرغ داری های صنعتی استان همدان
1398عفونت هایباکتریاییهمچنانیکیازمهم ترین مشکلاتگله هایطیوربهشمارمی روند. از جملهعوامل مهم عفونت هایباکتریاییدرطیور، باکتریاشریشیا کلیازخانوادهانتروباکتریاسه می باشد. در پرندگان حدود 10-15 درصد از جمعیت اشریشیا کلی دارای قدرت بیماری زایی بوده (Avian pathoghenic Esherichiacoli) که اغلب بدنبال آسیب سیستم ایمنی و یا تضعیف سد دفاعی پرندگان اهلی، باعث ایجاد عفونت های سیستمیک یا مزمن می شود. کلی باسیلوز طیور یکی از بیماری های عفونی پرندگان است که باکتری اشریشیا کلی عامل بیماری زای اولیه یا ثانوی آن است. هدف از انجام این مطالعه جداسازی و شناسایی اشریشیا کلی در جوجه های گوشتی مبتلا به کلی باسیلوز در مرغ داری های استان همدان و بررسی ژن های حدت در این جدایه ها بود. روش کار: در این مطالعه از 120 نمونه لاشه مشکوک به بیماری کلی باسیلوز از قسمت های کبد، کیسه هوایی، ترشحات نای و کلوآک نمونه گیری انجام شد و نمونه ها پس از کشت بر روی محیط مک کانکی و انجام آزمون های بیوشیمیایی تایید و دردمای С ْ20- نگهداری شدند. در ادامه با انجام آزمون PCR و با استفاده از ژن اختصاصی phoA ایزوله های مشکوک به اشریشیا کلی مورد تایید نهایی قرار گرفتند همچنین با استفاده از تکنیک MultiPlex PCR حضور ژن های حدت issوsitA در ایزوله ها بررسی گردید. ژن iss پروتئین iss را بیان می کند و در مقاومت به سرم نقش دارد و ژن sitAبه عنوان انتقال دهنده ای است که به ATP متصل می شود که میتواند مواد را در خلاف یا جهت شیب غلظت حمل کند، این پروتئین حالت آبگریز دارد. نتایج: از 120 نمونه لاشه طیور مشکوک به بیماری کلی باسیلوز، 248 جدایه باکتری اشریشیا کلی جداسازی و شناسایی گردید که از قسمت کلوآک 68 جدایه، از کبد 63 جدایه، از ترشحات نای 57 جدایه و از کیسه هوایی 60 جدایه شناسایی گردیدند. همچنین از این 248 جدایه 100 نمونه انتخاب شده وحضور ژن های حدت iss و sitA مورد بررسی قرار گرفت که از 25 جدایه کبد 20 جدایه (80%) دارای ژن sitA و 18 جدایه (72%) دارای ژن iss و 4 جدایه (16%) فاقد ژن حدت بود، از 27 جدایه کلوآک 25 جدایه (57/92%) دارای ژن sitA و 26 جدایه (29/96%) دارای ژن iss و یک جدایه (7/3%) فاقد ژن حدت بود، از 24 جدایه ترشحات نای 22 جدایه (66/91%) دارای ژن sitA و 22 جدایه (66/91%) دارای ژن iss و 2 جدایه (33/8%) فاقد ژن حدت بود، همچنین از 24
-
جداسازی کلی فرم ها از نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان در سال 1395
1397ورم پستان به التهاب بافت پستان که به دلایل مختلفی ایجاد می گردد، گفته می شود. ورم پستان بیشتر توسط میکروارگانیسم ها بخصوص باکتری ها که از طریق انتهای نوک پستان وارد بافت پستان شده و ایجاد عفونت می کنند بوجود می-آید. این بیماری در سراسر جهان به صنعت دامپروری و به تولید کنندگان لبنی خسارات فراوانی وارد می کند و به همین دلیل یکی از بیمارهای مهم در گاوهای شیری بشمار می رود. هر اندازه که ورم پستان مسری در گله ها بیشتر کنترل شود اهمیت ورم پستان محیطی افزایش می یابد. به دلیل اینکه یکی از پاتوژن های مهم دخیل در ورم پستان محیطی، کلی فرم ها می باشند، مطالعه حاضر با هدف شناسایی این گروه از باکتری ها از نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان انجام شد. بدین منظور تعداد 130 نمونه شیر از گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در طی یک دوره یک ساله و در فصول مختلف سال1395-1396 جمع آوری گردید. دو آزمون شمارش سلول های سوماتیک (SCC) و تست ورم پستان کالیفرنیا (CMT) بر روی تمام نمونه ها انجام شد، سپس با استفاده از کشت بر روی محیط های مک کانکی آگار و بلادآگار و با استفاده از تست های بیوشیمیایی، باکتری های مشکوک به کلی فرم شناسایی و برای تایید نهایی آنها از آزمونPCR استفاده شد. در این مطالعه برحسب جنس جدایه های بدست آمده از PCRهای مختلف استفاده گردید، همچنین این جدایه ها از نظر حساسیت آنتی-بیوتیکی به صورت فنوتیپی با استفاده از روش دیسک دیفیوژن مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج این مطالعه نشان داد که از مجموع 130 نمونه شیر 62 نمونه (69/47%) دارای امتیاز بالا در آزمون CMT و 62 نمونه شیر (69/47%) در آزمون SCC دارای امتیاز بالایی بودند. نتیجه آزمون آماری نشان داد که میزان همبستگی بین نتایج این دو آزمون (05/0 > P , 529/ r =) می باشد. از 130 نمونه شیر اخذ شده 61 مورد، هویت باکتری های جدا شده به عنوان کلی فرم مورد تایید قرار گرفت، که از این میزان، 54 جدایه به عنوان اشریشیا کلی، 5 نمونه تحت عنوان کلبسیلا پنومونیه و 2 مورد به عنوان انتروباکتر آئروژنز شناسایی شد. نتایج مربوط به حساسیت آنتی بیوتیکی حاکی از آن بود که بیشترین میزان مقاومت (100%) مربوط به آنتی بیوتیک های لینکومایسین، اریترومایسین، اگزاسیلین و تایلوزین می باشد. و جنتاماسین با مقاومت (63/1%) موثرترین آنتی
-
جداسازی و شناسایی عوامل استرپتوکوکی در نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در گاوداری های همدان
1396چکیده ورم پستان، التهاب غدد پستان است که معمولاً ناشی از عفونت های باکتریایی می باشد. ورم پستان به عنوان پر هزینه ترین بیماری گاو شیری در سرتاسر جهان مطرح می باشد. خسارات اقتصادی آن ناشی از کاهش تولید، دور ریختن شیر، افزایش حذف، هزینه های درمان و دامپزشک و... می باشد . طیف وسیعی از اجرام بیماری زا می توانند منجر به التهاب غدد پستانی شوند. استرپتوکوکوس آگالاکتیه، دیس گالاکتیه و یوبریس، پاتوژن های باکتریایی گرم مثبت هستند که گله های شیری را مبتلا می کنند. این تحقیق با هدف شناسایی عوامل استرپتوکوکی در نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان در گاوداری های صنعتی همدان صورت پذیرفت. در چهار فصل مختلف تعداد 130 نمونه شیر از 7 گاوداری شیری استان اخذ و مورد بررسی قرار گرفت. جدایه های استرپتوکوکی بر اساس خصوصیات کشت و تست های بیوشیمیایی شامل رنگ آمیزی گرم، تست کاتالاز، بررسی الگوی همولیز، تست اکسیداز، کشت روی محیط های بلاد آگار و مک کانکی جداسازی شد و سپس با استفاده از آزمون زنجیره ای پلیمراز ( PCR) نمونه های اخذ شده مورد بررسیlمولکولی قرار گرفت. بر اساس نتایج بدست آمده، بر پایه آزمون های میکروبی و مولکولی، مجموعاً 24 جدایه استرپتوکوکوس مورد شناسایی و تایید قرار گرفت. از مجموع 24 جدایه، 20 جدایه استرپتوکوکوس آگالاکتیه و 4 جدایه بعنوان استرپتوکوکوس دیس گالاکتیه تشخیص داده شد . حساسیت آنتی بیوتیکی این جدایه ها همچنین مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصل از این مطالعه نشان دهنده این است که عوامل استرپتوکوکی از عوامل اصلی ایجاد کننده ورم پستان بالینی در گاوداری های صنعتی استان همدان می باشد. از نتایج این تحقیق می توان جهت اتخاذ برنامه های کنترلی لازم به منظور کاهش موارد آلودگی و کمک به دامداران و دامپزشکان در درمان استفاده نمود. به علاوه استفاده از آنتی بیوتیک های مناسب جهت درمان این بیماری می تواند هزینه های درمان را کاهش دهد و از ضرر ناشی از کاهش شیر و انتقال آلودگی بین دام ها بکاهد.
-
جستجوی مولکولی کوکسیلا بورنتی در نمونه های شیر مخزن گاوداری های صنعتی استان همدان با استفاده از آزمون زنجیره ای پلیمراز
1396کوکسیلا بورنتی عامل مسبب تب کیو در انسان و حیوانات است. گاو، گوسفند و بز مخازن اصلی عفونت برای انسان می باشند. حیوانات آلوده تعداد بسیار زیادی باکتری را در ادرار، مدفوع، شیر، جفت و مایعات جنینی دفع می کنند. عفونت از طریق استنشاق آئروسل های آلوده یا خوردن شیر خام و محصولات لبنی تازه در انسان و حیوانات گزارش شده است. هدف از این مطالعه تشخیص کوکسیلا بورنتی (عامل تب کیو) در شیر مخزن گاوداری های صنعتی استان همدان با استفاده از تکنیک PCR است. در مطالعه حاضر در طول سال 1394، 125 نمونه شیر برای تشخیص کوکسیلا بورنتی با روش Trans PCR (با استفاده از پرایمرهای Trans 1و Trans 2) مورد آزمایش قرار گرفت. حضور مولکولی ژنوم باکتری کوکسیلا بورنتی در مجموع در9 نمونه شیر(2/7%) شناسایی شد که 64/9% از 83 نمونه مربوط به فصول گرم سال و 38/2% از 42 نمونه مربوط به فصول سرد سال بود. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که باکتری کوکسیلا بورنتی به عنوان عامل بیماری تب کیو در شیر گاوداری های صنعتی استان همدان شیوع نسبتا قابل توجهی دارد و می بایست اقدامات پیشگیرانه ای برای کنترل بیماری توسط مسئولین صورت گیرد.
-
جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورمپستان بالینی در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان در سال 1395
1396ورمپستان یکی از بیماری های مهم گاوهای شیری است که خسارت های اقتصادی فراوانی را به صنعت دامداری تحمیل می کند. از آنجا که در میان باکتری های عامل ورمپستان، استافیلوکوکوس اورئوس، به عنوان یکی از مهم ترین و شایع ترین عوامل محسوب می شود، مطالعه حاضر با هدف، جداسازی این باکتری از نمونه های شیر گاوهای مبتلا به ورمپستان بالینی در گاوداری های صنعتی شهرستان همدان انجام شد. بدین منظور، تعداد 130 نمونه شیر از گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی طی فصول مختلف سال های 1395 و 1396 جمع آوری و تست ورم پستان کالیفرنیا (CMT) و شمارش سلول های سوماتیک (SCC) بر روی این نمونه ها انجام شد. سپس، استافیلوکوکوس اورئوس ها با کشت نمونه های شیر بر روی محیط آگار خون دار، جداسازی و با استفاده از آزمون ها و محیط های بیوشیمیایی مانند رنگ آمیزی گرم، تست کاتالاز، تست کواگولاز، DNase و مانیتول سالت آگار، مورد تشخیص قرار گرفتند. پس از آن هویت تمامی جدایه ها و مقاومت آنها به متی سیلین به صورت ژنوتیپی با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز چندگانه (Multiplex PCR) به ترتیب تایید و ارزیابی شد. در ادامه، مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه ها به صورت فنوتیپی با روش انتشار دیسک نیز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که 70 نمونه شیر (84/53%)، نمونه-های دارای امتیاز بالا در تست CMT و 52 نمونه (40%)، نمونه های دارای امتیاز بالا در شمارش سلول های سوماتیک بودند. میزان هم بستگی بین نتایج دو آزمون CMT و SCC با استفاده از ضریب همبستگی اسپیرمن، 64/0 تعیین گردید. همچنین از تعداد 130 نمونه شیر اخذ شده، 33 نمونه (39/25%) به باکتری استافیلوکوکوس اورئوس آلوده بودند. نتایج آزمون حساسیت آنتی-بیوتیکی این جدایه ها نشان داد که بیشترین مقاومت (42/42%)، نسبت به آنتی بیوتیک پنی سیلین وجود داشت. در حالی که آنتی بیوتیک های ونکومایسین و اگزاسیلین، موثرترین آنتی بیوتیک ها بر علیه جدایه ها بودند و تمامی جدایه ها (100%)، نسبت به این دو آنتی بیوتیک حساس بودند. با این وجود، نتایج آزمون PCR Multiplex نشان داد که 5 عدد (15/15%) از جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس، واجد ژن mecA بودند و به عنوان استافیلوکوکوس اورئوس های مقاوم به متی سیلین (MRSA) شناسایی شدند. نتایج این مطالعه حاکی از شیوع بالای باکتری استافیلوکوکوس اورئوس به عنوان عامل مسبب
-
بررسی پاسخ های ایمنی گوسفندان واکسینه شده با واکسن Rev.1 تولید شده در موسسه رازی در سال 1395
1396چکیده: بروسلوز یکی از بیماری های مشترک بین انسان و دام است که با تب در انسان و سقط جنین در دام همراه است. عامل ایجاد این بیماری یک کوکوباسیل گرم منفی داخل سلولی اختیاری به نام بروسلا است. بروسلا دارای گونه های مختلف از جمله بروسلا ملی تنسیس می باشد که عامل اولیه بیماری در گوسفند و بز است. بهترین راه مقابله با بیماری بروسلوز واکسیناسیون است و بهترین واکسن برای پیشگیری از بروسلا ملی تنسیس واکسن Rev.1 است. هدف از انجام مطالعه حاضر بررسی پاسخ های ایمنی گوسفندان واکسینه شده با واکسن Rev.1 تولید شده در موسسه رازی بود. بدین منظور ابتدا 9 راس گوسفند 4 تا 6 ماهه غیر واکسینه تهیه شد. سپس گوسفندان به طور تصادفی به سه گروه تقسیم شدند و پس از آن به عنوان روز صفر خونگیری انجام شد. سپس به گوسفندان هر گروه یک دز از واکسن های Rev.1 اسپانیا (CZV)، Rev.1 موسسه رازی و Rev.1 آزمایشی تزریق شد و در روزهای 30، 60، 90، 120، 150، 180 و 210 پس از واکسیناسیون، خونگیری انجام گردید و آزمایش های سرولوژی شامل رزبنگال، رایت، 2-مرکاپتواتانول و الایزاهای سنجش میزان IgG و IgM بر ضد بروسلا ملی تنسیس انجام شد. به منظور بررسی ایمنی زایی در موش، تعداد 24 سر موش ماده سالم نژاد BALB/c تهیه شد و موش ها به صورت تصادفی به 4 گروه 6 تایی تقسیم شدند و طبق دستورالعمل سازمان جهانی بهداشت دام، ایمنی زایی هر 3 نوع واکسن Rev.1 مذکور در موش بررسی گردید. نتایج آزمایش های سرولوژی در گوسفندان نشان داد که هر 3 نوع واکسن باعث فعال شدن سیستم ایمنی هومورال شدند. بالاترین تیتر آزمایش رایت و 2-مرکاپتواتانول مربوط به 30 روز بعد از واکسیناسیون بود، نتایج آزمون های الایزا نشان داد که حداقل تا 7 ماه بعد از واکسیناسیون، آنتی بادی های IgG و IgM بر ضد بروسلا ملی تنسیس در نمونه های سرمی وجود داشت. بررسی ایمنی زایی در موش نیز نشان داد که واکسن Rev.1 اسپانیا (CZV) و واکسن Rev.1 موسسه رازی توانایی ایجاد ایمنی در موش را طبق الزامات سازمان جهانی بهداشت دام داشتند، هرچند واکسن Rev.1 آزمایشی، قابلیت ایجاد ایمنی در موش را نداشت و بنابراین جهت مصرف بالینی توصیه نمی شود.
-
مطالعه آلودگی مایکوپلاسمایی ریه گاوهای کشتار شده در کشتارگاه صنعتی همدان
1395مایکوپلاسماها پروکاریوت های بسیار کوچکی هستند که قادر به ساختن پپتیدوگلیکان دیواره سلولی نبوده و بنابراین در برابر برخی از آنتی بیوتیک های رایج مقاوم می باشند. آلودگی با این باکتری ها سبب ایجاد عفونت ها و عوارض مختلف تنفسی، چشمی، پستانی، ادراری- تناسلی و مفصلی در گاو می گردد. مشکلات تنفسی بخصوص بیماری کمپلکس تنفسی گاوان در در دهه های اخیر در گاوهای صنعتی افزایش یافته است. یکی از مهمترین عوامل پاتوژنیک مایکوپلاسمایی گونه مایکوپلاسما بویس می باشد که خسارات اقتصادی عمده ای را بر صنعت گاوداری در سراسر جهان تحمیل می کند. مطالعه حاضر به منظور برآورد میزان آلودگی ریه گاوهای کشتار شده در کشتارگاه صنعتی همدان به جنس مایکوپلاسما و گونۀ مایکوپلاسما بویس انجام گردید. نتایج آزمایشات هیستوپاتولوژی و ملکولی (PCR) که بر روی تعداد 108 نمونه ریه در فصول سرد و مرطوب (58 نمونه) و گرم و خشک (50 نمونه) انجام گردید تا حدودی تایید کننده یکدیگر بود بطوریکه تعداد 5 (6/4%) و 2 (85/1%) نمونه به ترتیب دارای ویژگی های میکروسکوپی عفونت جنس مایکوپلاسما و گونۀ مایکوپلاسما بویس، و تعداد 9 نمونه (3/8%) واجدDNA جنس مایکوپلاسما بودند. همچنین با استفاده از آزمون Nested PCR و تعیین سکانس، در تعداد 5 مورد (6/4%) از نمونه های مثبت جنس مایکوپلاسما، گونه مایکوپلاسما بویس تشخیص داده شد. نتایج این مطالعه نشان داد که آلودگی مایکوپلاسمایی در جمعیت گاوهای منطقه وجود دارد و میزان آلودگی ریوی آن با گزارشات تحقیقات دیگر کشورها، همخوانی دارد. بر اساس نتایج بدست آمده در این تحقیق و نقش مایکوپلاسماها به ویژه گونۀ مایکوپلاسما بویس در بروز بیماریهای تنفسی در گاو و کاهش قابل توجه تولید، انجام مطالعات بیشتر در منطقه و کشور و نیز ارائه راهکارهای مناسب توسط ارگانهای ذیربط جهت تشخیص و کنترل آلودگی مایکوپلاسمایی ضروری به نظر میرسد.
-
جستجوی مولکولی عفونت های مایکوپلاسمایی در نمونه های شیر مخزن گاوداری های صنعتی استان همدان
1395مایکوپلاسماها کوچک ترین باکتری های هستند که دیواره سلولی ندارند و این ویژگی باعث شده از دیگر باکتر ی ها متمایز شوند و به لحاظ اندازه بسیار کوچکشان و مشکلاتی که در زمینه کشت و جداسازی آن ها وجود دارد، کمتر مورد بررسی و مطالعه قرار گرفته اند. مایکوپلاسماها به عنوان سومین عامل ورم پستان مسری پس از استافیلوکوکوس اورئوس و استرپتوکوکوس آگالاکتیه مطرح هستند. ورم پستان گاو، شایع ترین و پرهزینه ترین بیماری است که گله های شیری سراسر جهان را تحت تاثیر قرار می دهد. در بین عوامل ایجادکننده ورم پستان، مایکوپلاسماها که بیشتر به شکل تحت بالینی یا مزمن دام را آلوده می کنند، نسبت به سال های گذشته افزایش یافته اند. بدین جهت در مناطق مختلف دنیا برنامه های خاصی جهت کنترل و پیشگیری از آن ها تدوین شده است. به منظور تعیین وضعیت آلودگی گاوداری های صنعتی استان همدان به عفونت مایکوپلاسمایی، طی سال 1394 از مخازن شیر این گاوداری ها، نمونه گیری به عمل آمد و با روش PCR به جستجوی این عفونت پرداخته شد. نتایج آزمون PCR حاصل از بررسی 125 نمونه شیر مخزن اخذ شده از 31 گاوداری شیری طی چهار مرتبه نمونه گیری، نشان داد که تعداد 19 نمونه (2/15 درصد) به جنس مایکوپلاسما آلوده بودند. از طرف دیگر، با توجه به اینکه مایکوپلاسما بوویس (M. bovis) با حدت بالا در بروز ورم پستان نقش ایفا می کند، نمونه هایی که در آزمون قبل مثبت بودند با استفاده از روش PCR آشیانه ای (Nested PCR) و پرایمرهای اختصاصی گونه بویس مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج این آزمون نیز نشان داد که تعداد 11 نمونه (8/8 درصد) از نمونه های مثبت قبلی به گونه مایکوپلاسما بوویس تعلق داشتند. نتایج این مطالعه حاکی از وجود آلودگی مایکوپلاسمایی (اعم از گونه بوویس و سایر گونه ها) در گاوداری های شیری صنعتی استان همدان می باشد و با توجه به نقش مایکوپلاسماها به ویژه گونه بوویس به عنوان یکی از عوامل مهم ورم پستان واگیردار که باعث کاهش تولید شیر و تغییر کیفیت آن می شود، توصیه می شود تا اقدامات پیشگیرانه و کنترلی مناسبی جهت مبارزه با این عفونت در گاوداری ها اتخاذ گردد.
-
شناسایی ژن لوکوسیدین پنتون ولنتین (PVL) در استافیلوکوکوس ارئوس های جدا شده از ضایعات پوستی بیماران ارجاعی به درمانگاه بیماریهای پوستی
1395استافیلوکوکوس ارئوس یکی از مهمترین عوامل ایجاد کننده عفونت های بیمارستانی و همچنین رایج ترین پاتوژن عامل عفونت زخم های پوستی می باشد. سویه های استافیلوکوکوس ارئوس تولید کننده لکوسیدین ویرولانس بالایی دارند و موجب انواع عفونت های پوستی و پنومونی می شوند. اعضای خانواده لکوسیدین های استافیلوکوکوس ارئوس شامل لکوسیدین پنتون ولنتین (PVL)، LukD/E، lukM و همولایزین 3 می باشد که به سلول های پلی مورفونوکلئار، مونوسیت ها و ماکروفاژهای انسان حمله می کنند. برخی مطالعات نشانگر ارتباط نزدیکی بین سویه های تولید کننده پنتون ولنتین لکوسیدین و سویه های استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به متی سیلین کسب شده از جامعه (CA-MRSA) هستند که موجب افزایش اهمیت این سویه های شده است. هدف از این مطالعه بررسی فراوانی ژن های کد کننده لکوسیدین استافیلوکوکوس ارئوس جدا شده از ضایعات پوستی بیماران مراجعه کننده به بیمارستان فرشچیان همدان بود. نمونه گیری از 138 بیمار بخش های مختلف بیمارستان انجام شد. نمونه ها با روش های معمول کشت و تست های بیوشیمیایی مورد بررسی قرار گرفت. تایید ژنوتیپی و شناسایی ژن های تولید کننده لکوسیدین با تکنیک PCR انجام شد. از مجموع نمونه هایمورد بررسی 8/6 درصد موارد استافیلوکوکوس ارئوس جداسازی شد. از این تعداد 41/6 درصد واجد ژن pvl،3/58 واجد ژن lukD/E،3/58 واجد ژن lukM و 66/6 دردصد واجد ژن mecA بودند. با توجه به فراوانی بالای ژن های تولید کننده لکوسیدین در سویه های مقاوم به متی سیلین و ویرولانس بالای این سویه ها تشخیص و درمان زود هنگام این سویه ها باید مد نظر قرار گیرد.
-
شناسایی ژن مقاومت به متی سیلین در استافیلوکوکوس اورئوس های کواگولاز مثبت جدا شده از پنیر سفید ایرانی سنتی عرضه شده در شهر همدان
1394شیر و فرآورده های لبنی دارای ارزش تغذیه ای بالایی بوده و مصرف آن در رژیم غذایی افرادرو به گسترش است. بنابراین یکی از مهمترین منابعی هستند که توسط عوامل بیو لوژیکی آلوده می شوند.پنیر از جمله فراورده های لبنی است که روزانه توسط افراد استفاده می شود غنی از پروتئین ومواد معدنی می باشد و عدم پاستوریزاسیون شیر مورد استفاده درانها ممکن است باعث الودگی انها به استافیلوکوکوس اورئوس شود. این تحقیق با هدف شناسایی ژن مقاومت به متی سیلین در استافیلوکوکوس اورئوس های کواگولاز مثبت جدا شده از پنیر سفید ایرانی سنتی عرضه شده در شهر همدان صورت پذیرفت. جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس بر اساس خصوصیات کشت و تست های بیوشیمیایی شامل رنگ آمیزی گرم، تست کاتالاز، تست کواگولاز، کشت روی محیط های بردپارکر آگار، مانیتول سالت آگار و DNase آگار جداسازی شد و سپس با استفاده از آزمون زنجیره ای پلیمراز ( PCR) حضور ژن های femA و mecA مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس نتایج بدست آمده از تعداد120نمونه پنیر سفید ایرانی( سنتی وصنعتی) اخذ شده از 60 مرکز عمده عرضه محصولات لبنی، بر پایه آزمون های مرسوم میکروبی و بررسی حضور ژن femA، مجموعا 19 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس مورد شناسایی و تایید قرار گرفت. تمام نمونه های استافیلوکوکوس اورئوس تایید شده با روش های آزمایشگاهی و مولکولی با روش انتشار دیسک از بابت مقاومت یا حساسیت به 13 نوع آنتی بیوتیک مختلف مورد بررسی قرار گرفتند. مقاومت به اگزاسیلین در3نمونه (78/15%) تشخیص داده شد. بیشترین مقاومت آنتی بیوتیکی به پنی سیلین (100%) و کمترین مقاومت به سیپروفلوکساسین وکانامایسین (26/5%) مشاهده گردید. هیچ یک از جدایه ها نسبت به آنتی بیوتیک ونکومایسین مقاومتی نشان ندادند. از مجموع 19 نمونه مورد بررسی تعداد 4 (05/21%) نمونه دارای ژن mecA بودند. نتایج حاصل از این مطالعه تایید می کند که رشد استافیلوکوکوس اورئوس در پنیر سفید ایرانی سبب به مخاطره افتادن بهداشت عمومی می گردد.به طور کلی نتایج این مطالعه نشان دهنده این واقعیت است که تولید پنیر سنتی بایستی در شرایط مطلوبی از نظربهداشتی صورت گیرد.همچنین به منظور اگاهی دامداران, تولید کنند گان وتوزیع کنندگان درخصوص شناخت کانون های الودگی ,به کارگیری تکنولوژی مناسب وبهداشتی در رابطه با تولید شیر وپنیر ونیز نگهداری مناسب آنها ضروری به نظر می رس
-
جدا سازی و شناسایی استرپتوکوکوس از ماهیان قزل آلای رنگین کمان در شهرستان سیروان - استان ایلام
1394آلودگی های باکتریایی آبزیان و بویژه ماهی از نظر ایجاد بیماری های مختلف در استخرهای پرورشی و همچنین به سبب احتمال انتقال عفونت به انسان از اهمیت فراوانی برخوردارند و بواسطه افزایش تاثیر اقتصادی این بیماری ها در پرورش آبزیان، اخیرا مطالعات زیادی در رابطه با بیماری زایی، اکولوژی، همه گیری شناسی و مدیریت بیماری های باکتریایی ماهی صورت گرفته است. استرپتوکوکوز از جمله بیماری های باکتریایی ماهیان است که انواع مختلف ماهیان وحشی و پرورشی به ویژه قزل آلای رنگین کمان را به صورت انفرادی و همه گیر در معرض خطر قرار داده و خسارات اقتصادی قابل توجهی را به دنبال دارد. این بیماری یکی از مهم ترین بیماری های تهدید کننده قزل آلای پرورشی در مناطق مختلف جغرافیایی از جمله اروپا، امریکا، استرالیا، ژاپن و ایران محسوب می شود. از جمله باکتری های مهم ایجادکننده استرپتوکوکوز، می توان به گونه های مختلف باکترهای جنس های استرپتوکوکوس و لاکتوکوکوس اشاره کرد. در تحقیق حاضر به منظور بررسی این بیماری، از 2 مزرعه پرورش ماهی قزل آلای رنگین کمان اطراف شهرستان ایلام، تعداد 120 عدد ماهی با علائم ظاهری تیرگی پوست، بادکردگی زیر شکم، کم تحرکی و اگزوفتالمی جمع آوری گردید و سپس از کبد، کلیه و طحال هر یک از آن ها نمونه برداری و کشت میکروبی انجام شد و هویت باکتری های جداسازی شده با استفاده از روش های بیوشیمیایی تعیین گردید. در مرحله بعد، هویت باکتری های مشکوک به جنس استرپتوکوکوس و گونه اینیه به روش مولکولی و با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز تایید گردید. بدین منظور، توالی ژن tuf (کد کننده فاکتور امتداد Tu) جهت تعیین جنس استرپتوکوکوس و 16S rRNA برای تعیین گونه اینیه مورد استفاده قرار گرفت. براساس نتایج کشت باکتریایی و آزمایشات بیوشیمیایی صورت گرفته بر روی 360 نمونه تهیه شده از کبد، کلیه و طحال ماهیان، تعداد 177 جدایه متعلق به جنس های استرپتوکوکوس و لاکتوکوکوس تشخیص داده شدند. آزمایشات مولکولی نشان داد که تمامی 177 جدایه متعلق به جنس استرپتوکوکوس بودند، که از میان آن ها 82 جدایه در آزمایش PCR، گونه اینیه تشخیص داده شدند. نتایج مطالعه حاضر علاوه بر تایید حساسیت و ویژگی بالای روش PCR و هم پوشانی بین نتایج آن و روشهای بیوشیمیایی نشان داد که 58 (33/48%) قطعه از ماهیان مورد مطالعه به استرپتوکوکوز مبتلا بودند و همچنین
-
شناسایی ژن انتروتوکسین A در استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده از برخی شیرینی های تر عرضه شده در سطح شهر همدان
1394استافیلوکوکوس اورئوس باعث مسمومیت غذایی از طریق آزاد کردن انتروتوکسین ها در غذا می شود. این باکتری به صورت گسترده ای در محیط پراکنده است و بر روی بسیاری از مواد غذایی وجود داشته و به طرق مختلف سبب آلودگی مواد غذایی می شود. باکتری استافیلوکوکوس اورئوس ممکن است در ضمن فرآوری مواد غذایی از طریق دست کارگران آلوده و یا توسط وسایل آلوده وارد مواد غذایی شود. شیرینی های تر پتانسیل بالایی جهت آلودگی به انواع میکروارگانیسم ها و ایجاد بیماری های غذازاد را دارند. با توجه به اهمیت آلودگی میکروبی این فرآورده ها، این مطالعه با هدف ارزیابی حضور ژن مولد انتروتوکسین A در استافیلوکوکوس اورئوس کوآگولاز مثبت جدا شده از نمونه های شیرینی خامه ای و شیرینی رولت عرضه شده در برخی از قنادی های سطح شهر همدان در سال 1393 انجام شد. کلیه جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس بر اساس خصوصیات کشت و تست های بیوشیمیایی جداسازی شدند و سپس با استفاده از روش PCR حضور ژن های femA و انتروتوکسین A مورد بررسی قرار گرفت. . نتایج نشان داداز مجموع 160 نمونه شیرینی خامه ای و رولت مورد مطالعه، تعداد61 نمونه آلوده (38/1 درصد) بهاستافیلوکوکوس اورئوسبودند. همچنین از مجموع 61جدایهتایید شده به روش مولکولی، 16جدایه (26/2 درصد) واجدژن مولد انتروتوکسین A بودند.بیشترین میزان آلودگی به جدایه ها در شیرینی خامه ای مربوط به ماه تیر و در شیرینی رولت مربوط به ماه مهر بود. با این وجود آلودگی در شیرینی های خامه ای بالاتر بود. بیشترین میزان جدایه های واجد ژن مورد ارزیابی در شیرینی خامه ای در ماه تیر و در شیرینی رولت در ماه شهریور و مهر تشخیص داده شد. با توجه به فراوانی میزان آلودگی میکروبی نمونه های شیرینی خامه ای و رولت مورد ارزیابی، ممکن است سلامت مصرف کننده به مخاطره افتاده و از طرف دیگر آلودگی این محصولات ضررهای اقتصادی فراوانی را بدنبال داشته باشد. با توجه به اهمیت موضوع، جهت کنترل آلودگی میکروبی این محصولات ارائه راهکارهای کنترل آلودگی، رعایت اصول اولیه بهداشتی، آموزش افراد شاغل در این زمینه و نظارت بیشتر ارگان های مسئول بر نحوه تولید و عرضه ضروری به نظر می رسد. لذا تشخیص این سویه ها و کنترل منبع آلودگی شیرینی خامه ای و شیرینی رولت باید به عنوان بخشی از استانداردهای کنترل کیفی شیرینی های تر مورد توجه قرار گیرد.
-
بررسی آلودگی به باکتری پاستورلا در قسمت فوقانی دستگاه تنفس گاوهای کشتار شده در کشتارگاه مریوان
1394پاستورلا یکی از عوامل مهم بیماری زای دستگاه تنفسی نشخوارکنندگان بویژه در گاو است. این مطالعه برای ارزیایی حضور باکتری پاستورلا در ناحیه بینی ولوزه در گاوهای کشتارشده به ظاهر سالم به عنوان حامل این باکتری در کشتارگاه دام شهرستان مریوان در منطقه غرب ایران انجام شد. بیماری های سپتی سمی هموراژیک و تب حمل ونقلبه وسیله پاستورلا مولتوسیدا و گاهی اوقات هم مانهمیا همولیتیکا(پیش تر پاستورلا همولیتیکا خوانده می شد) ایجاد می شود.از ابتدای پاییز سال 1392 تا پایان تابستان 1393طی یکسال از بینی ولوزه 184 راس گاو به ظاهر سالم تعداد 368نمونه اخذ شد.نمونه ها پس ازکشت روی محیط بلاد آگار در انکوباتوردر دمای 37 درجه به مدت 24 ساعت قرار داده شدند تا باکتری ها رشد کنند، سپس پرگنه ها دوباره کشت و خالص سازی شدند. باکتری های گرم منفی به وسیله رنگ آمیزی گرم و تست اسنات شناسایی و به دنبال آن برای شناسایی باکتری مشکوک به پاستورلا تست های بیوشیمایی شامل TSI،SIM ، مک کانکی، اوره، اکسیداز و کاتالاز انجام شد و چنانچه نتایج تست های باکتری با کلیدهای تشخصی باکتری شناسی جهت تشخیص پاستورلا همخوانی داشت برای تشخیص گونه باکتری تست های قندی مانیتول، دولسیتول، مالتوز، سوکروز، لاکتوز، گلوکز، سوربیتول، اورنیتین دکربوکسیلاز انجام شد. بر اساس نتایج به دست آمده تنها3 نمونه (7/1درصد) پاستورولا مولتوسیدا تشخیص داده شدند. موارد مثبت از گاوهای ماده دورگ بومی دو ساله ای بودند که در فصل پاییز نمونه گیری شده بودند. بنابر نتایج بدست آمده پیشنهاد می گردد در مطالعات بعدی شرایط فصلی، سنی و نیز اختلاف درجنس دام ها در رابطه با وضعیت حامل پاستورلا مورد توجه بیشتری قرار گیرد.
-
شناسایی ژن توکسین شوک توکسیک در استافیلوکوکوس اورئوس های جداشده از نمونه های شیر مشکوک به ورم پستان در گاوداری های صنعتی همدان
1393طیف وسیعی از اجرام بیماری زا می توانند منجر به التهاب غدد پستانی شوند. ورم پستان به عنوان پر هزینه ترین بیماری گاو شیری در سرتاسر جهان مطرح می باشد. استافیلوکوکوس اورئوس شایع ترین و از نظر اقتصادی مهم ترین عامل ایجاد عفونت های داخل پستانی در گاوهای شیری می باشد. لذا این میکروارگانیسم می تواند از طریق پستان مبتلا به ورم پستان بالینی و یا تحت بالینی، شیر را آلوده کرده و به راحتی در داخل شیر و فرآورده های آن رشد و تکثیر نموده و با تولید توکسین های بیماریزا منجر به بروز بیماری های مختلف شود. این تحقیق با هدف شناسایی و جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس های واجد ژن توکسین شوک توکسیک از نمونه شیرهای مشکوک به ورم پستان از گاوداری های صنعتی همدان صورت پذیرفت. جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس بر اساس خصوصیات کشت و تست های بیوشیمیایی شامل رنگ آمیزی گرم، تست کاتالاز، بررسی الگوی همولیز، تست کواگولاز، کشت روی محیط های بردپارکر آگار، مانیتول سالت آگار و DNase آگار جداسازی شد و سپس با استفاده از آزمون زنجیره ای پلیمراز ( PCR) حضور ژن های femA و tst مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس نتایج بدست آمده از تعداد 415 نمونه شیر اخذ شده از 7 گاوداری شیری طی دو بار نمونه گیری، بر پایه آزمون های مرسوم میکروبی و بررسی حضور ژن femA، مجموعا 76 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس مورد شناسایی و تایید قرار گرفت. همچنین نتایج بررسی ژن tst در جدایه های مورد ارزیابی حاکی از وجود تنها یک جدایه واجد این ژن بود. نتایج حاصل از این مطالعه تایید می کند که رشد استافیلوکوکوس اورئوس در شیر سبب به مخاطره افتادن بهداشت عمومی می گردد. بدین صورت که وجود توکسین های استافیلوکوکی در شیر خام که حتی با حرارت پاستوریزاسیون از بین نمی روند و گردش خطرناک این سویه ها در زنجیره غذایی و متعاقباً در جامعه خطر ایجاد بیماری برای میزبان و مصرف کنندگان را بیشتر می کند. به منظور کاهش آلودگی استافیلوکوکی در شیر، درمان و کنترل ورم پستان بالینی و تحت بالینی در دامداری ها توصیه می شود. همچنین رعایت بهداشت در طول تولید، حمل و نقل و ذخیره سازی شیر ضروری به نظر می رسد.
-
شناسایی ژن مقاومت به متی سیلین و پروفایل مقاومت آنتی بیوتیکی استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده از نمونه های شیر مشکوک به ورم پستان در گاوداری های صنعتی همدان
1393ورم پستان، به بروز پاسخ دفاعی پستان اطلاق می شود که معمولاَ ناشی از عفونت های باکتریایی می باشد. این بیماری به عنوان پر هزینه ترین بیماری گاو شیری در سرتاسر جهان مطرح می باشد. هنوز یک واکسن موثر علیه ورم پستان گاو در دسترس نیست. بررسی ها نشان می دهد که بیش از 25 درصد کل زیان های اقتصادی ناشی از بیماری ها می تواند مستقیماً در ارتباط با ورم پستان باشد. استافیلوکوکوس اورئوس شایع ترین و از نظر اقتصادی مهم ترین عامل ایجاد عفونت های داخل پستانی در دام های شیری می باشد. عامل حدود 40-30 درصد از موارد ورم پستانی گزارش شده استافیلوکوکوس اورئوس می باشد. لذا این میکروارگانیسم می تواند از طریق پستان مبتلا به ورم پستان بالینی و یا تحت بالینی استافیلوکوکی و یا از طریق محیط ، شیر را آلوده کرده و به راحتی در داخل شیر و فرآورده های آن رشد و تکثیر نموده و منجر به تولید آنترو توکسین های بیماریزا شود. هدف از این مطالعه شناسایی ژن مقاومت به متی سیلین و پروفایل مقاومت آنتی بیوتیکی استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده از نمونه های شیر مشکوک به ورم پستان در گاوداری های صنعتی همدان با روش PCR می باشد. در این مطالعه از 415 نمونه شیر گرفته شده تعداد 76 (31/18%) جدایه استافیلوکوکوس اورئوس با انجام رنگ آمیزی گرم، تست کاتالاز، بررسی الگوی همولیز، کشت روی محیط های مانیتول سالت آگار، بردپارکر، DNase و انجام تست های مولکولی جدا و تایید شد. تمام نمونه های استافیلوکوکوس اورئوس تایید شده با روش های آزمایشگاهی و مولکولی با روش انتشار دیسک از بابت مقاومت یا حساسیت به 11 نوع آنتی بیوتیک مختلف مورد بررسی قرار گرفتند. مقاومت به اگزاسیلین در 12 نمونه (78/15%) تشخیص داده شد. بیشترین مقاومت آنتی بیوتیکی به پنی سیلین (100%) و کمترین مقاومت به کلرامفنیکل (31/1%) مشاهده گردید. هیچ یک از جدایه ها نسبت به سیپروفلوکساسین و جنتامایسین مقاومتی نشان نداند. از مجموع 76 نمونه مورد بررسی تعداد 50 (78/65%) نمونه دارای ژن mecA بودند. نتایج این مطالعه نشان دهنده وجود شیوع قابل توجه مقاومت به آنتی بیوتیک متی سیلین در بین استافیلوکوکوس اورئوس های جدا شده از نمونه های مشکوک به ورم پستان بود. بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در جدایه های مورد مطالعه حاکی از تفاوت مقاومت به سایر آنتی بیوتیک ها، در جدایه های مقاوم به متی سیلین می باشد.
-
تآثیر مصرف ال- کارنیتین و 10 هفته تمرین هوازی منتخب روی سطوح سرمی CRP در موشهای دیابتی نوع 1
1392 -
تاثیر مصرف ال-کارنیتین و 10 هفته تمرین هوازی منخب روی سطوح سرمی CRP در موشهای دیابتی نوع 1
1392 -
جداسازی و شناسایی باکتری های اسید لاکتیکی از شکمبه گوسفند مهربان
1392